Question

（1）科學(xué)家用植物組織培養(yǎng)的方法，已經(jīng)把許多植物的離體組織或細(xì)胞，培養(yǎng)成完整植物體．請簡述利用胡蘿卜根，將其培養(yǎng)成正常植株的方法步驟．

 

（2）酵母菌與人們的日常生活密切相關(guān)，也是現(xiàn)代生物技術(shù)研究常用的模式生物，生物興趣小組對此進(jìn)行了下列研究．請你根據(jù)他們的研究內(nèi)容回答問題：
①固定酵母細(xì)胞時(shí)要將干酵母放入

 

中活化；并將溶化好的海藻酸鈉溶液要冷卻至室溫，其中冷卻的原因是

 

．
②在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，酵母菌的來源是

 

．
③土壤是酵母菌的大本營，若從含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分離到較純的酵母菌，最簡便的方案是在

 

條件下選擇培養(yǎng)．若要進(jìn)一步對酵母菌進(jìn)行分離與純化，除稀釋涂布平板法外，還有

 

．
④酵母菌的計(jì)數(shù)通常用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行，血球計(jì)數(shù)板每個大方格容積為0.1mm³，由400個小方格組成．現(xiàn)對某一樣液進(jìn)行檢測，如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)先

 

后再計(jì)數(shù)．若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

 

個．

Answer 1

考點(diǎn)：制備和應(yīng)用固相化酶,探究培養(yǎng)液中酵母種群數(shù)量的動態(tài)變化,酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋

專題：

分析：1、酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生活：在有氧時(shí)，酵母菌大量繁殖，但是不起到發(fā)酵效果；在無氧時(shí)，繁殖速度減慢，但是此時(shí)可以進(jìn)行發(fā)酵．在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵．20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．
2、固定化技術(shù)包括物理吸附法、化學(xué)結(jié)合法和包埋法，由于細(xì)胞體積大，難以吸附或者結(jié)合，一般采用包埋法．如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，則說明海藻酸鈉濃度太低，包埋的酵母菌數(shù)量太少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉濃度過高．

解答： 解：（1）利用胡蘿卜根培養(yǎng)成正常植株的方法步驟：制備（固體）培養(yǎng)基、切取（有形成層的）胡蘿卜根并消毒（外植體消毒）、接種、培養(yǎng)、移栽和栽培．①固定酵母（2）①細(xì)胞時(shí)要將干酵母放入蒸餾水中活化，使其恢復(fù)活躍的狀態(tài)；并將溶化好的海藻酸鈉溶液要冷卻至室溫，其中冷卻的原因是防止高溫殺死酵母菌．
②因葡萄皮上附著有野生型酵母菌，故在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，酵母菌的來源是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌．
③若從含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分離到較純的酵母菌，由于酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉均屬于需氧型，故最簡便的方案是在無氧條件下選擇培養(yǎng)．若要進(jìn)一步對酵母菌進(jìn)行分離與純化，除稀釋涂布平板法外，還有平板劃線法．
④通常用血球計(jì)數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)先稀釋后再計(jì)數(shù)．若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有=5×400÷（0.1×10-³）×10=2×10⁸個．
故答案為：
（1）制備（固體）培養(yǎng)基、切�。ㄓ行纬蓪拥模┖�蘿卜根并消毒、接種、培養(yǎng)、移栽和栽培
（2）①蒸餾水    防止高溫殺死酵母菌
②附著在葡萄皮上的野生型酵母菌
③無氧   平板劃線法
④稀釋   2×10⁸

點(diǎn)評：本題以酵母菌為素材，考查果酒和果醋制備、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、酵母細(xì)胞的固定化等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記和理解能力，屬于中檔題．