Question

【題目】下圖將某細(xì)菌基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的過(guò)程。 請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成___________，然后在DNA聚合酶作用下合成___________，獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)氨基酸序列，推測(cè)出___________，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的物質(zhì)有4種脫氧核苷三磷酸、模板、__________和_________，擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成。

（3）由A和載體B拼接形成C的過(guò)程稱為_____________。

Answer 1

【答案】互補(bǔ)的單鏈DNA 雙鏈DNA 相應(yīng)的mRNA序列 引物 耐熱性的DNA聚合酶 基因表達(dá)載體的構(gòu)建

【解析】

分析題圖：圖示是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運(yùn)載體（質(zhì)粒），C為重組質(zhì)粒，D為受體細(xì)胞。

（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過(guò)人工合成（化學(xué)）方法合成所需基因。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)所需的條件：引物、模板DNA（目的基因或A基因）、原料（4種脫氧核糖核苷酸）和耐熱性的DNA聚合酶、能量等。

（3）目的基因與運(yùn)載體結(jié)合稱為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心。