Question

12．生物技術(shù)實踐與生活的聯(lián)系非常緊密．請回答下列問題：
（1）貴州遵義仁懷茅臺酒聞名全國，其中起主要作用的微生物是酵母菌，為讓其更好的生長繁殖，應(yīng)將溫度控制在18～25℃．釀酒過程中是否有酒精的產(chǎn)生，可用重鉻酸鉀來檢驗，在酸性條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色．
（2）泡菜是喜愛羊肉粉的貴州人餐桌上不可少的腌制食品之一．制作泡菜時，泡菜壇一般用水密封，原因是乳酸菌是厭氧型細菌．泡菜中亞硝酸鹽的含量進行檢測，在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．
（3）手機高溫、潮濕的環(huán)境非常適合細菌的生長，引起食源性疾病的大腸桿菌就是其中之一，部分高中生卻沉迷于手機不能自拔．南中某興趣小組欲了解手機上大腸桿菌的種類及分布情況，進行如下實驗．請完善實驗內(nèi)容并回答相關(guān)問題：
實驗步驟：
①制含有碳源、氮源、水、無機鹽的固體培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)基中加人少量伊紅一美藍（使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)特定的顏色）；
②10名學(xué)生的手機正、反面采集樣品，分別接種至滅菌的培養(yǎng)基上，在37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24〜48h，選取呈現(xiàn)黑色的菌落；將接種針用灼燒法滅菌后，將選取的菌落接種到固體培養(yǎng)基，在恒溫搖床上培養(yǎng)24h，使細菌大量繁殖；
③用?稀釋涂布（平板）法將②過程所獲得的細菌接種到培養(yǎng)基上，分別統(tǒng)計菌落的種類和數(shù)目；④根據(jù)菌落的特征進一步鑒定大腸桿菌的類型．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

3、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）酵母菌生長繁殖的適宜溫度是18～25℃．酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液鑒定，溶液的顏色由橙色變成灰綠色．
（2）參與泡菜制作的乳酸菌屬于厭氧型細菌，因此泡菜壇一般用水密封．泡菜中亞硝酸鹽的含量進行檢測，在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．
（3）①培養(yǎng)基的基本成分有碳源、氮源、水、無機鹽．大腸桿菌可用伊紅美藍鑒定，因此，要分離大腸桿菌應(yīng)該制含有碳源、氮源、水、無機鹽的固體培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)基中加人少量伊紅一美藍（使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)特定的顏色）；
②接種針用灼燒滅菌法進行滅菌；
③接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)．因此，用 稀釋涂布（平板）法將②過程所獲得的細菌接種到培養(yǎng)基上，分別統(tǒng)計菌落的種類和數(shù)目．
故答案為：
（1）18～25℃灰綠色
（2）乳酸菌是厭氧型細菌  對氨基苯磺酸
（3）①碳源、氮源      伊紅一美藍    ②灼燒?稀釋涂布（平板）

點評 本題考查果酒和果醋的制作、微生物的分離和培養(yǎng)、泡菜的制作等，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的方法、實驗操作步驟等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累．