Question

【題目】在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以發(fā)熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究巾有著廣泛的應用。請回答下列問題：

(1)熒光素酶基因可以人工合成，也可以從_____中獲取。利用PCR技術(shù)擴增熒光素酶基因是利用___的原理。

(2)限制酶是切割DNA的工具酶，下圖為含有熒光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切點。若需利用酶切法（只用一種酶）獲得熒光素酶基因，最應選擇的限制酶是______

(3)熒光素酶基因常被作為基因工程中的標記基因，其作用是________， 熒光素酶基因也可以作為將為目的基因轉(zhuǎn)入某些動植物細胞中表達產(chǎn)生熒光素酶。將目的基因?qū)�入植物細胞的技術(shù)中，最常用的是____。

(4)下列關(guān)于質(zhì)粒運載體的說法正確的是________（多選）。

A．沒有限制酶就無法使用質(zhì)粒運載體

B．質(zhì)粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞

C．質(zhì)粒運載體可能是從細菌或者病毒的DNA改造的

D．質(zhì)粒運載體的復制和表達也遵循中心法則

E．質(zhì)粒運載體只有把目的基因整合到受體細胞的DNA中才能表達

(5)將目的基因?qū)�入植物細胞，目前常用的目的基因載體是Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的______上。將導入熒光素酶基因的植物細胞，可經(jīng)過___形成轉(zhuǎn)基因植株。

Answer 1

【答案】 基因文庫 PCR MSP1 篩選出含有目的基因的細胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ACD T-DNA 植物組織培養(yǎng)

【解析】試題分析：分析圖表：含有目的基因的外源DNA分子中含有限制酶BamHⅠ、SmaⅠ、MboⅠ和MspⅠ的識別序列和切割位點，其中BamHⅠ的酶切位點在目的基因的中間，SmaⅠ的酶切位點只有一個，SmaⅠ的識別序列中含有MspⅠ的識別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割。

（1）熒光素酶基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲取。PCR技術(shù)的原理是DNA復制。
（2）要獲得目的基因必須在目的基因的兩側(cè)相應的酶切位點進行切割，圖1中可以看出，BamHⅠ的酶切位點在目的基因的中間，故不可��；SmaⅠ的酶切位點只有一個，故不可取；根據(jù)表格可以看出，SmaⅠ的識別序列中含有MspⅠ的識別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割。

（4）質(zhì)粒作為運載體，必須先用同種限制酶切割，才能與目的基因整合重組，A正確；質(zhì)粒運載體與目的基因沒有成功重組也會被導入受體細胞，B錯誤；質(zhì)粒運載體可來自細菌，病毒的DNA改造，C正確；質(zhì)粒的本質(zhì)是小型環(huán)狀DNA，其復制和表達遵循中心法則，可獨立的在受體細胞表達，D正確，E錯誤。

（3）標記基因的作用是將含有目的基因的細胞篩選出來。將目的基因?qū)�入動物細胞常用顯微注射法。

（5）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。將轉(zhuǎn)基因受體細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株常用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。