現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(by)的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by,用Kpn1單獨(dú)酶切得到400 by和600 by兩種長(zhǎng)度的DNA分子,用EcoRI、Kpnl同時(shí)酶切后得到200 by和600 by兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是( )

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科目:高中生物 來(lái)源:2012-2013學(xué)年浙江省高三高考仿真模擬理科生物試卷 題型:綜合題

肺細(xì)胞中的let一7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let一7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)增強(qiáng)后,發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。

(1)進(jìn)行過(guò)程①時(shí),需用             酶切開(kāi)載體以插入let一7基因。進(jìn)行過(guò)程②時(shí),需用         酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于 細(xì)胞培養(yǎng)。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增let一7基因時(shí),在PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在該反應(yīng)體系中,目的基因擴(kuò)增了5代,則具有引物I的DNA所占的比例理論上為        。

(2)研究發(fā)現(xiàn),let一7基因能影響癌基因RAS的表達(dá),其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析,可從細(xì)胞中提取    進(jìn)行分子雜交,以直接檢測(cè)1et一7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中    (RASmRNA/RAS蛋白質(zhì))含量減少引起的。

(3)現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(bp)的DNA分子,用限制酶切開(kāi)后得到仍是長(zhǎng)度為1000 bp的DNA分子,說(shuō)明此DNA分子的形態(tài)為                  。

(4)某線性DNA分子分別用限制酶Hind Ⅲ和Sma I處理,然后用這兩種酶同時(shí)處理,得到如下片段(kb為千個(gè)堿基對(duì)):

限制酶

    片段及長(zhǎng)度

Hind Ⅲ

    2.5 kb,5.0 kb

Sma I

    2.0 kb,5.5 kb

Hind Ⅲ和Sma I

    2.5 kb,3.0 kb,2.0 kb

可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分別有            個(gè)識(shí)別序列。兩酶同時(shí)處理后得到的片段,再用限制酶EcoR I處理,結(jié)果導(dǎo)致凝膠上3.0 kb的片段消失,產(chǎn)生一種1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I將該線性DNA分子進(jìn)行切割,則可得到長(zhǎng)度分別為           的片段。

 

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現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000個(gè)堿基對(duì)(by)的DNA分子,用Eco R1單獨(dú)酶切后得到的DNA分子仍是1000 by,用Kpn1單獨(dú)酶切得到400 by和600 by兩種長(zhǎng)度的DNA分子,用EcoRI、Kpnl同時(shí)酶切后得到200 by和600 by兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是 (    )

 

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