Question

7．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗腫瘤蛋白（且具有抗菌能力）．這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視．若臨床使用發(fā)現(xiàn)此蛋白質(zhì)對(duì)腫瘤確良好的療效，可以通過(guò)基因工程技術(shù)導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)進(jìn)行大量生產(chǎn)．其過(guò)程大體如圖1：

（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有人工合成、PCR擴(kuò)增．
（2）酶切此家蠅DNA分子和酶切質(zhì)粒時(shí)，所用的限制酶可以不同，但是產(chǎn)生的粘性末端要滿(mǎn)足粘性末端能完全互補(bǔ)條件．
（3）將抗腫瘤基因?qū)�入大腸桿菌，并在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)產(chǎn)生了抗腫瘤蛋白，由于繁殖快、產(chǎn)量較高，因此在短時(shí)間內(nèi)就能獲得大量的抗腫瘤蛋白．
（4）細(xì)胞工程也可以將抗腫瘤蛋白臨床使用，下面是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖2回答：
①圖中A過(guò)程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細(xì)胞”是B淋巴（漿）細(xì)胞，要獲得能產(chǎn)生抗腫瘤蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞至少要經(jīng)過(guò)2次篩選．從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，給小鼠注射的特定的物質(zhì)是（特異性）抗原．
②圖中B過(guò)程是細(xì)胞融合，該過(guò)程需要用滅活的病毒（或仙臺(tái)病毒）、聚乙二醇或電激等誘導(dǎo)．

Answer 1

分析 單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞并經(jīng)專(zhuān)一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體，涉及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；雜交瘤細(xì)胞集合了兩個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，但不一定全部表達(dá)；單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準(zhǔn)確、快速等優(yōu)點(diǎn)．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有從基因文庫(kù)中獲取目的基因、PCR擴(kuò)增目的基因、人工合成目的基因．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，需要DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接起來(lái)，所以?xún)烧咝枰�相同的黏性末端且能完全互補(bǔ)．
（3）選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是：繁殖速度快，可以在短時(shí)間內(nèi)獲得要表達(dá)的蛋白質(zhì)．
（4）①單克隆抗體的制備過(guò)程中，采用的是已免疫的小鼠B細(xì)胞（漿細(xì)胞或效應(yīng)B細(xì)胞），即經(jīng)過(guò)注射特異性抗原，然后和骨髓瘤細(xì)胞的融合，需要經(jīng)過(guò)至少兩次篩選（第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選獲得能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞），最終篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞．
②圖中B過(guò)程是細(xì)胞融合，該過(guò)程需要用滅活的病毒（或仙臺(tái)病毒）、聚乙二醇或電激等誘導(dǎo)．
故答案為：
（1）人工合成   PCR擴(kuò)增          
（2）粘性末端能完全互補(bǔ)
（3）繁殖快、產(chǎn)量較高
（4）①B淋巴（漿）   2     （特異性）抗原 ②病毒（或仙臺(tái)病毒）

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能結(jié)合圖解準(zhǔn)確答題．