Question

【題目】人類復(fù)合型免疫缺陷癥患者體內(nèi)缺失腺苷酸脫氨酶(ADA)的基因，導(dǎo)致體內(nèi)缺乏腺苷酸脫氨酶。隨著基因工程的不斷發(fā)展，科學(xué)家利用基因治療治愈了人類復(fù)合型免疫缺陷癥，過程如下圖所示。請(qǐng)分析并回答下列問題：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟，圖中①代表的步驟是________________。

（2）圖中③表示目的基因的檢測與鑒定。檢測ADA基因是否存在于T細(xì)胞中，所采用的方法是___________________。檢測ADA基因是否轉(zhuǎn)錄時(shí)，未出現(xiàn)ADA基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，從基因表達(dá)載體的構(gòu)建角度推測，最可能的原因是______________________________________。

（3）含ADA基因的T細(xì)胞必需要能產(chǎn)生______________________，才能注入患者體內(nèi)，達(dá)到治療疾病的目的。這種治療方法屬于________________。

（4）基因工程中常用的載體，除上圖所示以外，還有____________和____________。

Answer 1

【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建 DNA分子雜交技術(shù) 基因表達(dá)載體上目的基因首端未加入啟動(dòng)子 腺苷酸脫氨酶(ADA) 基因治療 質(zhì)粒 λ噬菌體衍生物

【解析】

基因工程的基本操作程序包括：目的基因的獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；目的僅基因的檢測與鑒定。圖中①過程通過讓病毒感染攜帶有ADA基因的細(xì)胞，獲得含有ADA基因的重組DNA病毒；②過程相當(dāng)于把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③過程通過篩選獲得含ADA基因的T細(xì)胞。

（1）該過程以病毒為載體，圖中①代表的步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

（2）檢測ADA基因是否存在于T細(xì)胞中，屬于分子水平的檢測，應(yīng)采用DNA分子雜交�；�因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子是RNA聚合酶的結(jié)合部位，啟動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄，檢測ADA基因是否轉(zhuǎn)錄時(shí)，未出現(xiàn)ADA基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，從基因表達(dá)載體的構(gòu)建角度推測，最可能的原因是缺乏啟動(dòng)子或啟動(dòng)子不能發(fā)揮其功能。

（3）人類復(fù)合型免疫缺陷癥患者體內(nèi)缺失腺苷酸脫氨酶，含ADA基因的T細(xì)胞必需要能產(chǎn)生腺苷酸脫氨酶，才說明目的基因成功表達(dá)，才能注入患者體內(nèi)，達(dá)到治療疾病的目的。這種治療方法借助于基因工程，在體外轉(zhuǎn)化細(xì)胞，屬于基因（體外）治療。

（4）基因工程中常用的載體，包括質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和λ噬菌體衍生物。