Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答與胴腐病防治有關(guān)的問(wèn)題：

果樹(shù)的胴腐病是由某真菌引起的疾病，某中學(xué)的科研小組計(jì)劃分離出該真菌做藥物防治實(shí)驗(yàn)，為胴腐病的防治提供合理的建議，實(shí)驗(yàn)時(shí)使用的PDA培養(yǎng)基配方如下表所示：

物質(zhì)	馬鈴薯	葡萄糖	自來(lái)水	氯霉素
含量	200g	20g	1000mL	0．3g

（該真菌在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)有特定的形態(tài)特征）

（1）對(duì)該培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，一般建議采用的溫度和壓力分別是________，除溫度和壓力之外，影響高壓蒸汽滅菌效果的因素還有滅菌對(duì)象含菌量、滅菌對(duì)象PH、加熱與散熱速度以及________________等（答出2點(diǎn)即可）。

（2）為了觀察菌落，還需加入到培養(yǎng)基中的成分是________，培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到三角瓶或試管時(shí)必須用________。

（3）從染病枝條潰瘍處剪取患病組織，________后置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待菌落形態(tài)特征穩(wěn)定后，用________法將該菌轉(zhuǎn)移至三個(gè)分別含有等量0．5%水堿劑、40%福美砷、清水的PDA培養(yǎng)基中進(jìn)行抗藥性實(shí)驗(yàn)，每隔24h記錄一次最后劃線區(qū)域的菌落數(shù)目。

①選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的培養(yǎng)皿記錄作為結(jié)果，這樣可以防止________________。

②記錄結(jié)果如下：

小組	0．5%水堿劑	40%美福砷	清水
菌落數(shù)目	2	8	17

分析得出結(jié)論：________________________________________________________________。

（二）回答與棉花培育及應(yīng)用有關(guān)的問(wèn)題：

（1）用________代替熱堿來(lái)處理棉織物，可在比較溫和的PH及溫度條件下使處理后的織物手感柔軟且強(qiáng)度增大。若用某些微生物來(lái)處理棉織物，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量明顯變差，很可能是織物中的部分________被降解。

（2）為了培育岀“兔毛棉花”’，科研人員將兔角蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花受傷部位的細(xì)胞________中，再將這些細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，為鑒定最終是否成功培育出“兔毛棉花”，在分子水平上可采用的檢測(cè)方法是________________。

（3）棉酚是有毒性的化學(xué)物質(zhì)，主要存在于棉花的根、葉和棉籽等器官中。棉籽含有高質(zhì)量的蛋白質(zhì)，科硏人員希望棉籽能成為人類(lèi)的食物來(lái)源，除了對(duì)棉籽作脫酚處理之外，也可采用________技術(shù)對(duì)細(xì)胞中的特定基因進(jìn)行定點(diǎn)改造，此項(xiàng)操作________（“改變”或“不改變”）特定基因的核苷酸序列�？紤]到改造后的棉花要在自然環(huán)境中廣泛種植，棉花葉中應(yīng)________（“含有”或“不含有”）棉酚，理由是________________________。

Answer 1

【答案】90℃和500g/cm2 滅菌時(shí)間、滅菌對(duì)象的體積、滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度等 瓊脂（或凝固劑） 三角漏斗 消毒 劃線 因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)；計(jì)數(shù)誤差較大 0．5%水堿劑對(duì)該菌抑制效果最強(qiáng)，適合防治胴腐�。ɑ�0．5%水堿劑和40%美福砷都能抑制該菌生長(zhǎng)，0．5%苦水堿劑抑制效果更強(qiáng)，最適合防治胴腐�。� 果膠酶 纖維素 基因組（染色體DNA） 抗原-抗體雜交 基因敲除 改變 含有 讓棉花具有抗蟲(chóng)能力

【解析】

除了實(shí)驗(yàn)用具必須無(wú)菌外，各種培養(yǎng)基也必須是無(wú)菌的。培養(yǎng)基是微生物生存的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。“細(xì)菌喜葷， 霉菌喜素”，通常細(xì)菌培養(yǎng)基要用蛋白胨和酵母提取物來(lái)配制，還要加入一定量的氯化鈉，以維持一定的滲透壓；霉菌培養(yǎng)基一般用無(wú)機(jī)物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。此外，細(xì)菌通常要求在中性偏堿的環(huán)境中生長(zhǎng)，霉菌要求在中性偏酸的環(huán)境中生長(zhǎng)，因此，在制備培養(yǎng)基時(shí)需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的酸堿度。加入培養(yǎng)基的三角瓶、試管也要在121C下滅茵15min，如果培養(yǎng)基中有葡萄糖，為防止葡萄糖分解碳化，要用90℃和500g/cm2滅菌30min。

果膠是植物細(xì)胞壁的主要成分，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成。山楂(山里紅)的果實(shí)中果膠含量最多，煮沸的山楂泥可制成山楂糕，就是由于果膠的作用。果膠起著將植物細(xì)胞粘合在一起的作用，去掉果膠，就會(huì)使植物組織變得松散。果膠不溶于乙醇，這是鑒別果膠的一種簡(jiǎn)易方法。植物的細(xì)胞壁主要由纖維素、木質(zhì)素(lignin)和半纖維素組成。因此，在枯樹(shù)或草炭土中有許多能利用和分解這些物質(zhì)來(lái)作為能源的微生物。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并用于生產(chǎn)纖維素酶的菌種有綠色木霉。

（一）

（1）由于對(duì)該培養(yǎng)基中有葡萄糖成分，為了防止葡萄糖碳化，故在進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，一般建議采用的溫度和壓力分別是90℃和500g/cm2，除溫度和壓力之外，影響高壓蒸汽滅菌效果的因素還有滅菌對(duì)象含菌量、滅菌對(duì)象PH、加熱與散熱速度以及滅菌時(shí)間、滅菌對(duì)象的體積、滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度等
。

（2）菌落在固體培養(yǎng)基上才能形成，故為了觀察菌落，還需在該培養(yǎng)基中加入瓊脂（或凝固劑）已獲得固體培養(yǎng)基，通常用三角漏斗將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到三角瓶或試管中

（3）從染病枝條潰瘍處剪取患病組織經(jīng)過(guò)消毒后置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待菌落形態(tài)特征穩(wěn)定后，用劃線法將該菌轉(zhuǎn)移至三個(gè)分別含有等量0．5%水堿劑、40%福美砷、清水的PDA培養(yǎng)基中進(jìn)行抗藥性實(shí)驗(yàn)。

①為了防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)，通常選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的培養(yǎng)皿進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并記錄作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這樣可以避免出現(xiàn)較大的計(jì)數(shù)誤差。

②記錄的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在加入0．5%水堿劑的培養(yǎng)皿中菌落數(shù)最少，40%美福砷次之，故此可得出如下結(jié)論：0．5%水堿劑對(duì)該菌抑制效果最強(qiáng)，適合防治胴腐病（或0．5%水堿劑和40%美福砷都能抑制該菌生長(zhǎng)，0.5%水堿劑抑制效果更強(qiáng)，最適合防治胴腐�。�。

（二）（1）由分析可知，用果膠酶在比較溫和的PH及溫度條件下可使處理后的織物手感柔軟且強(qiáng)度增大。若用某些微生物來(lái)處理棉織物，由于某些微生物能產(chǎn)生纖維素酶，導(dǎo)致織物中的纖維素被分解，故織物質(zhì)量明顯變差。

（2）為了培育岀“兔毛棉花”，科研人員將兔角蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花愈傷組織細(xì)胞的基因組（染色體DNA）中，然后利用這些細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，獲得轉(zhuǎn)基因植株，為鑒定最終是否成功培育出“兔毛棉花”，在分子水平上可采用抗原-抗體雜交的方法來(lái)檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)。

（3）棉酚是有毒性的化學(xué)物質(zhì)，科硏人員希望棉籽能成為人類(lèi)的食物來(lái)源，除了對(duì)棉籽作脫酚處理之外，也可采用基因敲除技術(shù)對(duì)細(xì)胞中的特定基因進(jìn)行定點(diǎn)改造，通過(guò)基因敲除技術(shù)改變了特定基因的核苷酸序列。考慮到改造后的棉花要在自然環(huán)境中廣泛種植，為了使改造后的棉花能很好的適應(yīng)環(huán)境，棉花葉中應(yīng)含有棉酚，因?yàn)槊薹邮怯卸镜幕瘜W(xué)物質(zhì)，該物質(zhì)的存在能讓棉花具有抗蟲(chóng)能力。