Question

【題目】疫苗和抗體已被廣泛應用于預防與診療傳染性疾病的過程，已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原。疫苗的生產(chǎn)和抗體的制備流程如下圖所示，請回答下列問題：

(1)③構建A基因重組載體時，啟動子和終止子是重新構建的，它們應該能被受體細胞的________所識別，以便于其催化轉(zhuǎn)錄過程。

(2)下圖為A基因的結構示意圖，已知Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)是2000個，其中陰影區(qū)域堿基數(shù)是800個，空白區(qū)域中G和C的總數(shù)共有400個，則由該區(qū)域轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的能指導蛋白質(zhì)合成的mRNA中A和U總數(shù)是________個。

(3)在給小鼠皮下注射A蛋白時，要重復注射幾次的目的是通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的________數(shù)目。過程⑥的實質(zhì)為________。

(4)在將X進行擴大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過________次篩選，其中包括_______________和__________,擴大培養(yǎng)的原理是________。

(5)對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的________來制備疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒與已知病毒進行核酸序列比較，或用圖中的________與分離出的病毒進行特異性檢測。

Answer 1

【答案】 RNA聚合酶 400 漿細胞 基因的選擇性表達 2 篩選出雜交瘤細胞 篩選出產(chǎn)生特定（抗A蛋白）抗體的雜交瘤細胞 細胞增殖(有絲分裂) A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】試題分析：本題考查基因工程、基因的表達、細胞工程、免疫，考查對基因表達載體組成、轉(zhuǎn)錄過程、單克隆抗體制備流程與應用、二次免疫及免疫應用的理解。解答此題，可根據(jù)基因中堿基比例關系和轉(zhuǎn)錄過程中的堿基互補配對原則進行第（2）小題的計算，根據(jù)漿細胞和小鼠骨髓瘤細胞的融合結果分析兩次篩選的目的。

(1)A基因重組載體中，啟動子和終止子是RNA聚合酶的識別部位，以開始和結束轉(zhuǎn)錄過程。

(2) Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)為2000個，減去陰影部分堿基數(shù)800個，得到空白區(qū)的堿基數(shù)為1200個，該區(qū)段能指導蛋白質(zhì)合成，其中C和G占400個，則A和T共800個，每條鏈中A和T有400個，轉(zhuǎn)錄以基因的一條單鏈為模板，根據(jù)堿基互補配對原則，轉(zhuǎn)錄得到的RNA中A和U應為400個。

(3)給小鼠皮下注射A蛋白時，重復注射幾次的目的是讓小鼠產(chǎn)生更快、更強的二次免疫反應，使記憶細胞增殖、分化，產(chǎn)生較多的漿細胞。過程⑥為B細胞的分化過程，其實質(zhì)是基因的選擇性表達。

(4)漿細胞和小鼠骨髓瘤細胞融合后，由于存在多種融合細胞，首先要用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，然后經(jīng)克隆化培養(yǎng)，用A蛋白作為抗原檢測，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞。擴大培養(yǎng)過程中雜交瘤細胞通不斷的有絲分裂，增加雜交瘤細胞數(shù)目。

(5)對健康人進行該傳染病免疫預防時，圖中基因工程生產(chǎn)的病毒表面的A蛋白可作為疫苗，刺激機體產(chǎn)生記憶細胞和抗體，但不會使人致病。對該傳染病疑似患者確診時，可利用單克隆抗體特異性強、靈敏度高的特點，用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體與分離出的病毒進行特異性檢測。