Question

8．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，制備抗A蛋白抗體的部分流程如下圖．

請(qǐng)回答：
（1）①代表的是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程．為獲得A基因表達(dá)載體，需用限制酶對(duì)A基因和運(yùn)載體進(jìn)行切割．將A基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增A基因時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是A基因兩端的部分核苷酸序列，加入引物的作用是與A基因單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后再DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸．
（3）與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較，PCR反應(yīng)要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，并且要嚴(yán)格控制溫度等條件．
（4）過(guò)程③采用的技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞融合，獲得的X叫雜交瘤 細(xì)胞．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；②是獲取目的基因（A基因）的過(guò)程；③是細(xì)胞融合過(guò)程；X為雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增A基因時(shí)，根據(jù)A基因兩端的部分核苷酸序列設(shè)計(jì)引物序列，加入引物的作用是與A基因單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后再DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸．
（3）PCR擴(kuò)增目的基因的過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．因此，與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較，PCR反應(yīng)要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，并且要嚴(yán)格控制溫度等條件．
（4）③過(guò)程需要采用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，根據(jù)圖中信息可知X為雜交瘤細(xì)胞．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄     限制      顯微注射法
（2）A基因兩端的部分核苷酸序列      與A基因單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后再DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸
（3）溫度
（4）動(dòng)物細(xì)胞融合     雜交瘤

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程圖，考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱(chēng)，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．