Question

2．干旱會影響農(nóng)作物產(chǎn)量，科學家們對此進行了研究．如圖為用探針檢驗某一抗旱植物基因型的原理，相關基因用R和r表示．

（1）在利用PCR技術擴增R或r基因的過程中，利用引物可尋找抗旱基因的位置并進行擴增．
（2）若被檢植株發(fā)生A現(xiàn)象，不發(fā)生B、C現(xiàn)象．據(jù)此推測檢測另一抗旱植物時會發(fā)生A或B（填“A”、“B”或“A 或 B”）現(xiàn)象．
（3）獲取抗旱基因時需要用到限制酶，限制酶能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定棱苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二醋鍵斷開．
（4）經(jīng)檢測，抗阜基因已經(jīng)導入到煙草細胞，但未檢測出抗旱基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA，從構建基因表達載體的角度推測，最可能的原因是基因表達載體上目的基因的首端未加入啟動子．
（5）要快速繁殖轉(zhuǎn)基因抗旱煙草植株，目前常用的技術是植物組織培養(yǎng)，該技術的基本過程是：將離體的煙草細胞誘導脫分化形成愈傷組織，然后再分化出根和芽并發(fā)育成小植株．該技術在作物新品種的培育方面兩個最主要的應用是：突變體的利用和單倍體育種．

Answer 1

分析 1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結構和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程．細胞分化的實質(zhì)：基因的選擇性表達．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等

解答 解：（1）用PCR技術擴增R或r基因時，需要用引物尋找抗旱基因的位置．
（2）A圖顯示R基因探針形成雜交斑而r基因探針無雜交斑，表示該抗旱植物基因型為RR，同理B圖表示Rr，C圖表示rr．另一抗旱植物基因型為RR或Rr，因此會發(fā)生“A或B”現(xiàn)象．
（3）限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（4）經(jīng)檢測，抗旱基因已經(jīng)導入到煙草細胞，但未檢測出抗旱基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA，從構建基因表達載體的角度推測，最可能的原因是基因表達載體上目的基因首端未加入啟動子．
（5）植物組織培養(yǎng)技術可快速繁殖抗旱煙草植株，該技術包括脫分化和再分化兩個基本過程，其中即將離體的煙草細胞誘導脫分化形成愈傷組織，然后再分化出根和芽并發(fā)育成小植株．該技術在作物新品種的培育方面兩個最主要的應用是：突變體的利用和單倍體育種．
故答案為：
（1）引物
（2）A或 B
（3）磷酸二醋鍵
（4）基因表達載體上目的基因的首端未加入啟動子
（5）植物組織培養(yǎng)    愈傷組織    單倍體育種

點評 本題考查細胞分化、基因工程等知識，要求考生識記細胞分化的概念，掌握細胞分化的實質(zhì)；識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結合所學的知識準確答題．