Question

細胞融合技術可制備抗X病毒單克隆抗體．請分析回答：
（1）將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射X病毒，其目的是

 

，乙組注射

 

作為陰性血清

 

對照
（2）免疫一段時間后，取甲組小鼠脾臟細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，融合時需加入

 

試劑誘導融合，細胞融合的原理是

 

（3）利用特殊的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)融合細胞一定時間后，培養(yǎng)基上生長的就僅有雜交瘤細胞

 

，細胞都會死亡．雜交瘤細胞不同于小鼠脾臟細胞的特性是

 

．
（4）用多孔培養(yǎng)板培芥雜交瘤細胞并收集上清液，收集上淸液的原因是

 

o將上清液加入到另一個預先包埋好

 

的培養(yǎng)板上，進行抗體陽性檢測．將陽性孔中的細胞繼續(xù)進行培養(yǎng)，檢測并選擇單個產生抗體能力強和抗體特異性強的雜交瘤細胞植入小鼠腹腔內進行

 

培養(yǎng)，可從腹水中提取到單克隆抗體．
（5）為了保存有價值的雜交瘤細胞系，通常用超低溫將其凍存，請分析其原因

 

．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：制備單克隆抗體，需對雜交瘤細胞進行篩選，注入抗原，看是否發(fā)生凝集反應，通常實驗要做對照實驗實驗組注入一定量的抗原，對照組注入等量不含抗原的溶液，低溫保存是利用酶在低溫條件下活性被抑制而不變性利于保存其特性．

解答： 解：（1）本實驗屬于對照類實驗．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射X病毒，其目的是引起小鼠產生對X病毒的免疫應答，并使抗體達到一定濃度，乙組作為空白對照組，應注射等量的生理鹽水．
（2）動物細胞融合過程中使用的化學誘導劑為聚乙二醇，細胞融合的原理是細胞膜的流動性．
（3）特殊的選擇培養(yǎng)基篩選的目的為篩選出雜交瘤細胞，未融合的細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡．雜交瘤細胞集合效應B細胞和骨髓瘤細胞的遺傳特點，即既能產生特異性抗體，又能無限增殖，而不小鼠脾臟細胞不能無限增殖．
（4）由于抗體主要分布在上清液中，因此用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)雜交瘤細胞并收集上清液．將上清液加入到另一個預先包埋好X病毒的培養(yǎng)板上，進行抗體陽性檢測．將陽性孔中的細胞繼續(xù)進行培養(yǎng)，檢測并選擇單個產生抗體能力強和抗體特異性強的雜交瘤細胞植入小鼠腹腔內進行克隆培養(yǎng)，可從腹水中提取到單克隆抗體．
（5）超低溫抑制了酶的活性，利于細胞特性的長期保存，因此可用超低溫將雜交瘤細胞進行凍存，用來保存有價值的雜交瘤細胞系．
故答案為：
（1）引起小鼠產生對X病毒的免疫應答，并使抗體達到一定濃度    等量生理鹽水 
（2）PEG  細胞膜的流動性 
（3）未融合的細胞和融合的具有同種核的  能無限增值 
（4）抗體被分泌到上清液中   X病毒  克隆 
（5）超低溫抑制了酶的活性，利于細胞特性的長期保存．

點評：本題考查了單克隆抗體制備的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力；具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析、處理，能對一些簡單的實驗方案做出恰當?shù)脑u價和修訂的能力．