Question

家蠶細胞具有高效表達外源基因能力．將人干擾素基因?qū)�入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥．
①進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用

 

酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
②為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的

 

和

 

之間．
③采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞．PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、

 

和

 

；在PCR反應過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是

 

．
④利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以

 

增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因工程是指按照人類的愿望，將不同生物的遺傳物質(zhì)在體外人工剪切并和載體重組后轉(zhuǎn)入細胞內(nèi)進行擴增，并表達產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的技術(shù)．基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點．
2、PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫．PCR是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)．通過這一技術(shù)，可以獲取大量的目的基因．PCR擴增反應需要兩種引物、模板DNA、原料（4種脫氧核苷酸）、酶（耐高溫的DNA聚合酶）．

解答： 解：①進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
②為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
③PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和（對干擾素基因特異性的）DNA引物；在PCR反應過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是引物結(jié)合到互補DNA鏈上．
④利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換．
故答案為：
①胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
②啟動子                  終止子
③TaqDNA聚合酶      （對干擾素基因特異性的）DNA引物     引物結(jié)合到互補DNA鏈上  
④增大細胞貼壁生長的附著面積

點評：本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷能力．基因工程是考查的重點知識，與細胞工程、胚胎工程等現(xiàn)代生物技術(shù)都有一定聯(lián)系．復習時可以建立知識框架，幫助記憶和理解．