DNA復(fù)制過程中,保證復(fù)制準(zhǔn)確無誤進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是
A.破壞氫鍵并使DNA雙鏈分開 B.游離核苷酸與母鏈堿基互補(bǔ)配對(duì)
C.配對(duì)的游離核苷酸連接成子鏈 D.子鏈與模板母鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟(jì)有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對(duì)基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行,PCR技術(shù)有效地解決了這個(gè)問題。如今對(duì)基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時(shí)代,從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
(1)某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí),不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起,已知青霉素會(huì)影響固氮菌的生長(zhǎng)繁殖,但不影響真菌的生長(zhǎng)繁殖。請(qǐng)?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實(shí)驗(yàn)步驟:
①分別配置 的培養(yǎng)基和 的培養(yǎng)基,分別分成兩份,依次標(biāo)上A、a、B、b備用;
②分別向A、B培養(yǎng)基接種 ;
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d;
④從A、B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的 中挑取生長(zhǎng)良好的菌株,分別接種到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。
PCR反應(yīng)體系 | 50ul |
緩沖液 | 5ul |
脫氧核苷酸 | 1ul |
引物A | 0.5ul |
引物B | 0.5ul |
DNA聚合酶 | 0.5U |
模板DNA | 1-2ul |
加去離子水補(bǔ)足至50 ul |
反應(yīng)條件 | ||
溫度 | 時(shí)間 | |
變 性 | 95℃ | 30s |
復(fù) 性 | 55℃ | 30s |
延 伸 | 72℃ | 1min |
30個(gè)循環(huán)后 | 適宜 | 5-10min |
保 溫 | 4℃ | 2h |
①從上表中可得出,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,主要區(qū)別之一是 。
此外,從反應(yīng)條件看,所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有__________的特點(diǎn)。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________ ________________。
②下圖為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請(qǐng)繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。
(3)在對(duì)固氮基因產(chǎn)物的生產(chǎn)研究中,需要從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)。下圖表示蛋白質(zhì)提取和分離實(shí)驗(yàn)涉及的相關(guān)原理。
①圖甲表示相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),原因是 。
②圖乙所示實(shí)驗(yàn)?zāi)M電泳現(xiàn)象,U型管左側(cè)的顏色逐漸變深,原因是 。
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