Question

9．人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原．疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程如圖：

（1）過程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄．②過程可以通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增A基因，該技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制．
（2）過程③構(gòu)建A基因重組載體時，必須使用限制酶和DNA連接酶兩種工具酶．
（3）若受體細(xì)胞為動物細(xì)胞，過程④常用的方法是顯微注射法（技術(shù)）．
（4）動物細(xì)胞融合過程中，區(qū)別于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)．
（5）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)之前，至少需要經(jīng)過兩次篩選，方法分別是用選擇性培養(yǎng)基篩選和用專一抗體檢測．
（6）以上實驗操作過程中用到的技術(shù)除了PCR技術(shù)還有轉(zhuǎn)基因技術(shù)（基因工程）、動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（至少寫三個）．
（7）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白來制備疫苗．對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較，或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體與分離出的病毒進(jìn)行特異性檢測．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；④是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑤是從小鼠皮下獲取已經(jīng)免疫的B細(xì)胞的過程；⑥表示B細(xì)胞的增殖和分化過程；⑦是細(xì)胞融合過程；X為雜交瘤細(xì)胞；⑧表示克隆化培養(yǎng)和獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆轉(zhuǎn)錄．PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因，其原理是DNA復(fù)制．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，必須使用限制酶和DNA連接酶兩種工具酶，即首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（3）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇），誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）．因此，動物細(xì)胞融合過程中，區(qū)別于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)．
（5）在單克隆抗體的制備過程中，至少需要經(jīng)過兩次篩選，一次是用用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；另一次是用專一抗體檢測方法篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（6）以上實驗操作過程中用到的技術(shù)除了PCR技術(shù)還有轉(zhuǎn)基因技術(shù)（基因工程）、動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)．
（7）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗．對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較；或采用抗原-抗體雜交法，即用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄                 PCR                DNA雙鏈復(fù)制
（2）DNA連接酶      
（3）顯微注射法（技術(shù)）        
（4）用滅活的病毒誘導(dǎo)
（5）選擇性培養(yǎng)基       專一抗體
（6）轉(zhuǎn)基因技術(shù)（基因工程）、動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
（7）A蛋白           抗A蛋白的單克隆抗體

點評 本題結(jié)合疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程圖，考查基因工程、動物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體等知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，識記單克隆抗體的制備過程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱．