Question

4．家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)目的基因的能力，科研人員將人的干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥．
（1）某限制酶能專一性的識(shí)別DNA上GAATTC序列，并在特定位點(diǎn)切割某化學(xué)鍵，該化學(xué)鍵的名稱是磷酸二酯鍵．
（2）人的干擾素鑒因一般來自cDNA文庫，其屬于部分基因（填“基因組”或“部分基因”）文庫．
（3）基因工程操作過程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（4）將目的基因?qū)�入家蠶細(xì)胞的常用方法是顯微注射法．目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，首先要檢車轉(zhuǎn)基因生物（染色體）DNA是否插入了目的基因，這是目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵．
（5）通過PCR技術(shù)可大量獲取目的基因，PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）限制酶切割的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵．
（2）cDNA文庫屬于部分基因文庫．
（3）基因工程操作過程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（4）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的常用方法是顯微注射法．目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，首先要檢車轉(zhuǎn)基因生物（染色體）DNA是否插入了目的基因，這是目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵．
（5）PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制．
故答案為：
（1）磷酸二酯鍵
（2）部分基因  
（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建   首端    RNA聚合酶
（4）顯微注射法   （染色體）DNA是否插入了目的基因    
（5）DNA復(fù)制

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．