Question

近十年來，PCR技術(shù)（多聚酶鏈式反應(yīng)）成為分子生物學實驗室里的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進行DNA的人工復(fù)制，在很短時間內(nèi)，將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不在受限于活的生物體．根據(jù)PCR技術(shù)原理，回答下列問題．
（1）標準的PCR過程一般分為

 

、

 

、

 

三大步驟．
（2）引物是此過程中必須加入的物質(zhì)，從化學本質(zhì)上說，引物是一小段

 

．
（3）當溫度降低時，引物與模板

 

端結(jié)合，在DNA聚合酶作用下，引物沿著模板延伸，此過程中原料是

 

，遵循的原則是

 

．
（4）如果把模板DNA的兩條鏈用¹⁵N標記，游離的脫氧核苷酸不作標記，控制“94℃-55℃-72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有¹⁵N標記的DNA占

 

．

Answer 1

考點：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用

專題：

分析：PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．

解答： 解：（1）標準的PCR過程一般分為高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸三大步驟．
（2）PCR過程中，必須加入一小段DNA或RNA作為引物，結(jié)合到互補鏈DNA上．
（3）當溫度降低時，引物與模板3'端結(jié)合，在DNA聚合酶作用下，引物沿著模板延伸，此過程中原料是四種脫氧核苷酸，遵循的原則是堿基互補配對原則．
（4）如果循環(huán)3次，則可形成8個DNA分子，其中含有¹⁵N標記的DNA分子為2個，占子代DNA的

1

4

．
故答案為：
（1）變性    復(fù)性    延伸
（2）DNA或RNA
（3）3'四種脫氧核苷酸    堿基互補配對原則
（4）

1

4

點評：本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記PCR技術(shù)的概念、原理、條件及過程，能與體內(nèi)DNA復(fù)制進行比較，再結(jié)合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．