Question

研究人員將魚的抗凍基因?qū)�入番茄體內(nèi)，獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種．下列操作合理的是（　�。�

• A、設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
• B、利用限制酶和DNA聚合酶構(gòu)建基因表達(dá)載體
• C、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞之前需用Ca²⁺處理細(xì)胞
• D、運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：A、獲取抗凍基因時(shí)，可設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，A正確；
B、利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，B錯(cuò)誤；
C、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞的方法有基因槍法、花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這三種方法都不需用Ca²⁺處理細(xì)胞，C錯(cuò)誤；
D、運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，但不能檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)，D錯(cuò)誤．
故選：A．

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具、操作步驟及應(yīng)用，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．