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在基因工程中，當限制性核酸內切酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的DNA兩條單鏈的切口是平整的，這樣的切口叫平末端，如下圖所示：

已知加入DNA連接酶后平末端的連接效率低于粘性末端，下列關于產生此現(xiàn)象的可能原因或改進措施的說法錯誤的是

A．連接平末端時只有DNA連接酶起作用，缺乏粘性末端的突出堿基的互補作用

B．常用的DNA連接酶與平末端的親和力比粘性末端的大

C．提高DNA連接酶濃度是改進平末端連接效率低下的有效方法

D．適當提高溫度也是改進平末端的連接效率低下的有效方法

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

37．（8分）大腸桿菌pUC18質粒是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質粒上的唯一酶切位點位于LacZ基因中，如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達出口一半乳糖苷酶。當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被β一半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落。反之，則形成白色菌落。下圖表示利用此質粒實施基因工程的主要流程。

       請分析并回答：

   （1）已獲得的目的基因可利用    技術進行擴增。

   （2）目的基因插入質粒構建重組質粒的過程中，需要DNA連接酶恢復       鍵。

   （3）將試管I中的物質和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是        ；大腸桿菌需事先用Ca2+進行處理，目的是         。

   （4）將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應含有大腸桿菌必需的營養(yǎng)物質包括    和生長因子，還應加入IPTG、X-gal以及氨芐青霉素，其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出        。

   （5）若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)    色菌落，則說明大腸桿菌中已成功導入了重組質粒。如果作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則不利于重組質粒的篩選，原因是          。

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科目：高中生物 來源：重慶一中2010級高三下學期考前模擬理綜生物 題型：綜合題

Ⅰ、（12分）有一種病人不能抵抗疾病，只能生活在無菌室里，如果離開無菌室，就會受到病毒感染而死亡。原因是其體內缺乏一種腺苷酶基因。其治療方案如右圖所示。
（1）仿照上述方案設計一個為某男性患者治療血友病的方案，請完成有關步驟：
第一步：取出患者的皮膚細胞進行細胞培養(yǎng)；
第二步：提取目的基因；
第三步：                             
第四步：將重組體（即重組DNA）導入受體細胞，即讓這種攜帶有正常凝血因子基因的無害病毒去感染在體外培養(yǎng)的                   
第五步：根據病毒上的標記基因檢測皮膚細胞是否導入了正常凝血因子基因，并檢測是否產生了                 
第六步：將含有目的基因的皮膚細胞擴大培養(yǎng)，當各種指標達到要求后，再與膠原細胞混合，制成注射針劑。將含有這種活細胞的針劑注射到患者體內，并在患者體內表達，使患者的凝血因子達到可以止血的含量。
（2）基因工程中常用到的受體細胞有細菌、真菌和動植物細胞等，此處取患者本人的皮膚細胞作為受體細胞進行培養(yǎng)，是為了防止發(fā)生          。

（3）假設以大腸桿菌質粒作為運載體，并以同一種限制酶切割運載體與目的基因，將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。兩兩片段間連接產物中至少有         種環(huán)狀DNA分子。它們分別是                                  
                          。
Ⅱ、（10分）如圖為高等動物細胞亞顯微結構模式圖。請據圖作答：
（1）若此圖示旺盛分泌腸液（含多種消化酶）的小腸上皮細胞，則其形態(tài)結構必然具有下列         （填序號）特點。
①細胞分泌面有較多的皺褶；②皺褶下和內質網附近分布著較多的線粒體；③細胞的內質網與高爾基體很發(fā)達；④細胞內核糖體豐富。
（2）如果該細胞是效應B細胞，培養(yǎng)在含放射性標記的某種氨基酸的培養(yǎng)基中，之后在產物中檢測到帶有放射性的抗體。放射性出現(xiàn)的先后順序應該是          
（可供選擇的物質和結構是①細胞核  ②核糖體  ③染色體  ④線粒體  ⑤內質網  ⑥細胞膜  ⑦中心體  ⑧高爾基體）
（3）若此圖示衰老的細胞，除細胞核體積增大外，細胞膜發(fā)生的變化是                      
                     。

（4）右圖為該細胞進行細胞分裂過程中不同時期的細胞圖像，則該高等動物的性別是       ，其體細胞中染色體數(shù)目是         。

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科目：高中生物 來源：重慶一中2010級高三下學期考前模擬理綜生物 題型：綜合題

Ⅰ、（12分）有一種病人不能抵抗疾病，只能生活在無菌室里，如果離開無菌室，就會受到病毒感染而死亡。原因是其體內缺乏一種腺苷酶基因。其治療方案如右圖所示。

（1）仿照上述方案設計一個為某男性患者治療血友病的方案，請完成有關步驟：

第一步：取出患者的皮膚細胞進行細胞培養(yǎng)；

第二步：提取目的基因；

第三步：                              

第四步：將重組體（即重組DNA）導入受體細胞，即讓這種攜帶有正常凝血因子基因的無害病毒去感染在體外培養(yǎng)的                   

第五步：根據病毒上的標記基因檢測皮膚細胞是否導入了正常凝血因子基因，并檢測是否產生了                  

第六步：將含有目的基因的皮膚細胞擴大培養(yǎng)，當各種指標達到要求后，再與膠原細胞混合，制成注射針劑。將含有這種活細胞的針劑注射到患者體內，并在患者體內表達，使患者的凝血因子達到可以止血的含量。

（2）基因工程中常用到的受體細胞有細菌、真菌和動植物細胞等，此處取患者本人的皮膚細胞作為受體細胞進行培養(yǎng)，是為了防止發(fā)生           。

（3）假設以大腸桿菌質粒作為運載體，并以同一種限制酶切割運載體與目的基因，將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。兩兩片段間連接產物中至少有          種環(huán)狀DNA分子。它們分別是                                   

                           。

Ⅱ、（10分）如圖為高等動物細胞亞顯微結構模式圖。請據圖作答：

（1）若此圖示旺盛分泌腸液（含多種消化酶）的小腸上皮細胞，則其形態(tài)結構必然具有下列          （填序號）特點。

①細胞分泌面有較多的皺褶；②皺褶下和內質網附近分布著較多的線粒體；③細胞的內質網與高爾基體很發(fā)達；④細胞內核糖體豐富。

（2）如果該細胞是效應B細胞，培養(yǎng)在含放射性標記的某種氨基酸的培養(yǎng)基中，之后在產物中檢測到帶有放射性的抗體。放射性出現(xiàn)的先后順序應該是           

（可供選擇的物質和結構是①細胞核  ②核糖體  ③染色體  ④線粒體  ⑤內質網  ⑥細胞膜  ⑦中心體  ⑧高爾基體）

（3）若此圖示衰老的細胞，除細胞核體積增大外，細胞膜發(fā)生的變化是                       

                      。

（4）右圖為該細胞進行細胞分裂過程中不同時期的細胞圖像，則該高等動物的性別是        ，其體細胞中染色體數(shù)目是          。

 

 

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

（08衡陽八中模擬）I. （16分）為研究酵母菌發(fā)酵的產物，某研究小組設計了如圖所示的裝置圖。①號、②號試管中均加入3mL蒸餾水和少許0．1％溴麝香草酚藍（簡稱BTB），直至溶液呈藍綠色時為止。（當環(huán)境偏酸性時，BTB溶液呈黃色）請回答下列問題：

（1）該實驗是否可以去掉②號試管?_______。請說明理由：                           。

（2）①號試管的現(xiàn)象是____________，其作用是_______________。

（3）該實驗中需要等到煮沸的葡萄糖液冷卻后才能加酵母菌，原因是________________。

（4）圖乙中哪條曲線能正確表示氣泡釋放速率的變化？___________。

（5）若要證明釋放的氣泡是酵母菌所產生的，就需要設置一個對照實驗，該對照實驗應在原實驗的基礎上做哪些改動？______________________。

Ⅱ．我國科學家根據農業(yè)的需要，將一種來自螺旋藻中的與光合作用相關的基因移植到普通水稻基因中，該轉基因水稻的生長周期顯著縮短，光合作用速率增長70％，淀粉含量大幅增加，達到了周期短、見效快、糧食增產的目的。   

（1）在該基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，以便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是―↓GATC―，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是 ―G↓GATCC―，根據圖示判斷，正確的操作應該是用___________切割質粒，用______________來切割目的基因片段。

   

 

（2）為了避免轉基因水稻攜帶的目的基因通過花粉傳遞給近緣物種，最好將該基因植入水稻細胞的____________的DNA中。

（3）簡要寫出確定“螺旋藻基因是轉移到水稻的葉綠體內還是轉移到染色體上?”的步驟。

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科目：高中生物 來源： 題型：

（08銀川一中一模）【現(xiàn)代生物科技專題】

I．（8分）加利福尼亞大學的一組科學家通過基因工程技術成功地將螢火蟲的熒光素酶基因導入到大腸桿菌體內。

（1）在此基因工程中，科學家通過反轉錄法獲得目的基因，此方法需要使用的酶__________（兩種）。

（2）將目的基因導入大腸桿菌需要運載體的幫助。作為運載體需具備的條件有________。

A．能夠在宿主細胞內復制并穩(wěn)定保存   B．具有特定的限制酶切點

C．具有與目的基因相同的堿基片斷     D．具有某些標記基因

 

（3）培育能發(fā)熒光的植物是生物工程學家的美好愿望之一。如果利用基因工程技術將熒光素酶基因成功導入植物細胞，并使之表達。請簡述利用這些轉基因細胞培育成能發(fā)熒光的植物幼苗的過程。

 

II．（7分）干擾素是一類具有很高生物活性的糖蛋白，它具有抑制多種病毒復制的功能，是一種廣譜抗病毒物質。為了能在體外獲得大量的干擾素，有人進行了實驗，可是當將T淋巴細胞在體外培養(yǎng)繁殖了幾代后，細胞分裂就停止了。請你用細胞工程的方法，以小鼠為實驗對象，提出一個既能使T淋巴細胞在體外培養(yǎng)繁殖，又能獲得大量干擾素的實驗設計思路。

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