Question

18．動物器官的體外培養(yǎng)技術對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大．圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖．請回答下列問題．
（1）肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物．
（2）氣室中充入5% C0₂氣體的主要作用是維持培養(yǎng)液適宜的pH．
（3）培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細菌生長，但要注意選擇抗生素的種類和劑量，以保證抗生素對肝臟無害．
（4）有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂．利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用．
材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細胞，淋巴細胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機物X溶液等．
實驗過程：
①在淋巴細胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞，取4等份，備用．
②利用甲、乙、丙、丁4組如圖所示裝置，按如表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）．

	甲	乙	丙	丁
步驟一：加人肝臟培養(yǎng)液	√	√	√	√
步驟二：加入有機物X溶液	√		√
步驟三：放置肝臟小塊	√

上表中還需進行的操作是向乙（或�。┙M裝置中放置肝臟小塊．
③培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)．
④一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片．在顯微鏡下觀察染色體形態(tài)和數(shù)量，并對比分析．若丙組淋巴細胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細胞正常，則說明肝臟小塊對有機物X具有解毒作用．

Answer 1

分析 1、動物細胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
2、肝臟切成小薄片可以增大與外界環(huán)境的接觸面積；抗生素可以殺菌；對照實驗要遵循單一變量原則．

解答 解：（1）把肝臟切成小薄片，有利于肝臟細胞的呼吸代謝，即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物．
（2）氣室中充入5% CO₂的作用是維持培養(yǎng)液適宜的pH．
（3）為了防止雜菌的生長，可在培養(yǎng)基中添加適量的抗生素，但要注意選擇抗生素的種類和劑量，以保證抗生素對肝臟無害．
（4）為了排除是肝臟培養(yǎng)液或是肝臟小塊對實驗的影響，應向乙或丁裝置中放置肝臟小塊；由題目中古姆薩染液（使染色體著色），應該是觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目；為有機物X對淋巴細胞的毒害作用，當出現(xiàn)丙異常，甲乙丁正常，說明對細胞的毒害是物質(zhì)X引起的，同時加入肝臟小塊和X時，細胞正常，說明肝臟小塊對有機物X有解毒作用．
故答案為：
 （1）吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物
（2）維持培養(yǎng)液適宜的pH
（3）種類和劑量
（4）②向乙（或丁）組裝置中放置肝臟小塊
④染色體形態(tài)和數(shù)量         肝臟小塊對有機物X具有解毒作用

點評 本題結(jié)合探究實驗，考查動物細胞培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記動物細胞培養(yǎng)的過程及條件；明確實驗的目的，能根據(jù)實驗原則完善實驗步驟，并能根據(jù)實驗現(xiàn)象得出正確的實驗結(jié)論．