Question

【題目】請根據(jù)所學(xué)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和應(yīng)用知識(shí)，回答下列問題：

（1）在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有______、______和高壓蒸汽滅菌。

（2）滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰旁將培養(yǎng)基倒入滅過菌的培養(yǎng)皿中，這個(gè)操作稱為______。此過程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過火焰，目的是______。

（3）如圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中______（填圖中序號(hào)）區(qū)域更易獲得單菌落，判斷依據(jù)是______。

（4）稀釋涂布平板法常用于統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)，先將菌液進(jìn)行一系列的______，然后取少量菌液涂布在培養(yǎng)基表面，這種方法得到的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是______。

Answer 1

【答案】灼燒滅菌 干熱滅菌 倒平板 防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基 ③ 每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結(jié)束時(shí)更容易獲得單菌落 梯度稀釋 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上只能形成一個(gè)菌落

【解析】

（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂。②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)。兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的。③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌。

（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。

培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。

（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。

（1）常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。

（2）倒平板操作是指滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)基冷卻至 50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰旁將培養(yǎng)基倒入滅過菌的培養(yǎng)皿中。為避免瓶口微生物污染培養(yǎng)基此過程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過火焰。

（3）據(jù)圖分析可知，圖示為平板劃線法得到的平板，依據(jù)是每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結(jié)束時(shí)更容易獲得單菌落，圖中③區(qū)域更易獲得單菌落。

（4）用稀釋涂布平板法接種之前，需要將菌液進(jìn)行梯度稀釋。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上只能形成一個(gè)菌落，故由此得到的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低