Question

13．通過基因工程研制的某新型基因治療藥物，其本質(zhì)是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼裝得到的重組病毒．人的P53蛋白可對癌變前的DNA損傷進(jìn)行修復(fù)，使其恢復(fù)正常，或誘導(dǎo)其進(jìn)入休眠狀態(tài)或細(xì)胞凋亡，阻止細(xì)胞癌變．該藥物的載體采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主細(xì)胞的基因組中，無遺傳毒性；載體經(jīng)基因工程改造后，只對細(xì)胞實(shí)施一次感染，不能復(fù)制，不會污染．請回答下列問題：
（1）在該藥物的生產(chǎn)中，為了獲得更高的安全性能，在載體一般應(yīng)具備的條件中，科學(xué)家選擇性地放棄了一般載體都應(yīng)該具有的自我復(fù)制（復(fù)制原點(diǎn)）（在“能自我復(fù)制”“有多個限制性酶切位點(diǎn)”“在宿主細(xì)胞中能穩(wěn)定保存”中選答）．檢測P53基因基因是否插入到染色體上，可從分子水平上檢測，方法是DNA分子雜交．
（2）如果要獲取人類基因組中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括從細(xì)胞中分離和人工方法合成．目的基因的大量擴(kuò)增則可以采用PCR技術(shù)技術(shù)，該技術(shù)中需使用一種特殊的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）如果要獲得胚胎干細(xì)胞進(jìn)行研究，則胚胎干細(xì)胞可來源于囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，或胎兒的原始性腺，也可以通過核移植技術(shù)得到重組細(xì)胞后在進(jìn)行相應(yīng)處理獲得．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時就可以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段．

Answer 1

分析 1、基因工程中獲得目的基因的方法有三種：①從基因文庫中獲��；②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；③人工合成．
2、目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
3、PCR的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
3、胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）．胚胎干細(xì)胞是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料．ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段；

解答 解：（1）據(jù)題意可知，載體經(jīng)基因工程改造后，只對細(xì)胞實(shí)施一次感染，不能復(fù)制，不能污染．故在載體一般應(yīng)具備的條件中，科學(xué)家選擇性地放棄了一般載體都應(yīng)該具有的自我復(fù)制功能．檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（2）如果要獲取人類基因組中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括從細(xì)胞中分離和通過化學(xué)方法人工合成．目的基因的大量擴(kuò)增則可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)需要高溫處理，因此需使用的一種特殊的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）胚胎干細(xì)胞可來源于早期胚胎（囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）或原始性腺，也可以通過核移植技術(shù)得到重組細(xì)胞后再進(jìn)行相應(yīng)處理獲得．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時就可以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段． 
故答案為：
（1）自我復(fù)制（復(fù)制原點(diǎn)）  DNA分子雜交
（2）從細(xì)胞中分離    PCR技術(shù)         熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）   
（3）囊胚        核移植          分化誘導(dǎo)因子

點(diǎn)評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識記胚胎干細(xì)胞的來源、特點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．