Question

PCR技術(shù)有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對樣品進(jìn)行研究的問題,而被廣泛應(yīng)用,此過程需要一種Taq DNA聚合酶?

請回答有關(guān)問題:

(1)體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA,而PCR技術(shù)中應(yīng)用__________________?

(2)TaqDNA聚合酶是從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離的?

①為什么Taq細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來呢?

____________________________

②TaqDNA聚合酶的功能是____________________________?

③TaqDNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),可用________法和________法進(jìn)行分離?

(3)從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí),應(yīng)采取的措施是_______________,原因是__________________________________?

(4)相對于細(xì)菌分離,而DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜的多?

①在DNA提取中兩次用到蒸餾水,其目的分別是:______________________?________________________?

②實(shí)驗(yàn)中能否以哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料?為什么?

______________　　 ,　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ______?

(5)與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較,PCR反應(yīng)要在________中才能進(jìn)行,并且要嚴(yán)格控制________條件?

(6)PCR中加入的引物有________種,加入引物的作用是________________?

 

Answer 1

(1)高溫使DNA分子熱變性

(2)①熱泉70℃~80℃的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物

②催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵

③凝膠色譜 電泳

(3)將細(xì)菌在培養(yǎng)基中培養(yǎng),其中惟一的氮源是尿素

只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖

(4)①使血細(xì)胞破裂,釋放出DNA分子 稀釋NaCl溶液,使DNA分子析出

②不能,哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無核DNA分子

(5)一定的緩沖溶液 溫度

(6)2 作為DNA復(fù)制的起點(diǎn)

 

(1)PCR技術(shù)中用高溫使DNA分子中的氫鍵打開,從而解旋?(2)①利用細(xì)菌特有的特性而與其他細(xì)菌區(qū)分開來,Taq細(xì)菌具有耐高溫的特性,放在高溫環(huán)境下,其他絕大多數(shù)細(xì)菌死亡,而Taq細(xì)菌得以保留?②在DNA分子復(fù)制中,TaqDNA聚合酶將兩個(gè)脫氧核苷酸的脫氧核糖和另一脫氧核苷酸的磷酸連結(jié)形成磷酸二酯鍵?③蛋白質(zhì)的分離可以根據(jù)其分子大小和帶電的性質(zhì)和多少使之分離,即凝膠色譜法和電泳法?(3)在分離分解尿素的細(xì)菌時(shí),應(yīng)在培養(yǎng)基上加入尿素這一種氮源而使不能利用尿素的細(xì)菌不能生存?(4)①在使用蒸餾水時(shí),第一次使血細(xì)胞破裂,第二次使NaCl溶液濃度降低至0.14 mol/L?(5)PCR反應(yīng)是在一定的緩沖溶液中進(jìn)行的,并需嚴(yán)格控制好溫度條件?(6)PCR中與體內(nèi)DNA復(fù)制過程中的原料是完全相同的,并加入小段單鏈DNA或RNA作為引物,引導(dǎo)DNA復(fù)制,可以使游離的脫氧核苷酸與之結(jié)合形成磷酸二酯鍵,成為DNA復(fù)制的起點(diǎn)?