Question

人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據(jù)圖回答：

(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有 ??????????? 。

(2)若要分析雜交瘤細(xì)胞中染色體，可通過???????? 等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察。雜交瘤細(xì)胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是????? ，在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括??? (填下列序號)。①無抗體分泌的細(xì)胞? ②抗HPV抗體的分泌細(xì)胞③其它無關(guān)抗體的分泌細(xì)胞

(3)對于抗體檢測呈??????????? 性的雜交克隆應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～l0個(gè)細(xì)胞/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液?????? mL(0.1／1／10)，使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

(4)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是???????? 。

(5)科學(xué)家從某些無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請?jiān)俸喴獙懗鲆环N制備單克隆抗體的思路 ????????????????????????????????? 。

 

Answer 1

【答案】

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合（2分）? （2）解離、漂洗、染色和制片? 染色體數(shù)目加倍? ①②③ （2分）（3）陽? 0.1 （4）因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)（2分）

（5）通過基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無限增殖細(xì)胞中

【解析】

試題分析：（1）單克隆抗體制備過程中要將淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，為動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，要培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

（2）觀察細(xì)胞染色體制片流程：解離、漂洗、染色和制片。雜交瘤細(xì)胞具有無限增殖能力，觀察到的染色體數(shù)目往往增倍，而普通淋巴細(xì)胞高度分化，能夠產(chǎn)生抗體，不再分裂，染色體數(shù)目不增倍。雜交瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，故其他類型融合細(xì)胞可以生存，即骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞，能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細(xì)胞與能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞，不能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細(xì)胞與不能夠產(chǎn)生抗HPV抗體淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞，故①②③都能生存。

(3)檢測后能夠產(chǎn)生抗HPV抗體即抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞要行克隆化，以便產(chǎn)生單克隆抗體。有限稀釋法因?yàn)?/span>稀釋細(xì)胞到3～l0個(gè)細(xì)胞/mL，故每孔加入細(xì)胞稀釋液0.1 mL，，使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

（4）因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)，故由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體。

（5）據(jù)題意，可以通過基因工程向漿細(xì)胞細(xì)胞核染色體DNA中導(dǎo)入prG，提取該漿細(xì)胞細(xì)胞核，和去核的無限增殖細(xì)胞融合為重組細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體。

考點(diǎn)：本題考查單克隆抗體激素相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力；能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論能力。