Question

某同學(xué)想研究氨基酸的分離和鑒定的方法。已知實驗室中有0.5%的賴氨酸,脯氨酸,纈氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸溶液以及它們的混合液(各組份濃度均為0.5%)。現(xiàn)提供如下器材和試劑：

A.器材

1.層析缸 2.毛細管 3.噴霧器 4.層析濾紙 5.其他相關(guān)器材(剪刀,鉛筆,透明膠帶等)

B.試劑

1.擴展劑:4份水飽和的正丁醇和1份醋酸的混合物（作為層析液使用）2.顯色劑:0.1%茚三酮溶液

一)若該同學(xué)想證明混合液確實含有上述5種氨基酸，請利用題給條件設(shè)計試驗：

1)實驗原理：

A.所有氨基酸和一切蛋白質(zhì)都能和茚三酮發(fā)生顏色反應(yīng)。

B.在一定條件下, 不同氨基酸在擴展劑的溶解度不同,所以在濾紙上的擴散速度不同,從而出現(xiàn)在濾紙的不同位置上。

2)實驗步驟：

①取層析濾紙一張,剪成20厘米長,14厘米寬的濾紙條,在紙的一端距邊緣2-3厘米處用鉛筆畫一條直線,在此直線上每間隔2厘米作一記號,共需作　　　 處記號.

②　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

③將處理好的濾紙條卷成筒狀用透明膠帶固定,放入加好了擴展劑的層析缸中，待擴展劑上升到一定階段時取出濾紙,自然風(fēng)干。本步驟的注意事項是:　　　　　　　　　　　

④　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

3)請在下圖中繪出濾紙條上的預(yù)期結(jié)果：(已知擴散速度為賴氨酸<脯氨酸<纈氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　

用“＋”表示起點位置；用“○”表示氨基酸擴散的相對位置。鉛筆細線（示起始位置）

4)若用上述5種氨基酸合成5肽,在不考慮氨基酸種類重復(fù)情況下,形成的5肽最多有　 種。

 

Answer 1

2)實驗步驟：

① 6 ②毛細管吸取氨基酸樣品點在標記上,干燥后重復(fù)2-3次。③ 點樣的一端在下,擴展劑的液面要低于點樣線。④用噴霧器向濾紙上均勻噴上0.1%的茚三酮溶液,待干燥后,觀察并記錄層析斑點的位置.

3)（說明：其它合理的圖也給分）

4) 120種