Question

【題目】硝基苯酚是工業(yè)污水中重要污染物，某同學(xué)欲從污水處理廠污泥中分離分解硝基苯酚的細(xì)菌。請回答下列有關(guān)問題：

（1）為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細(xì)菌，在配置培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇_______(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作為碳源，不采用其他兩組的原因是_________________

（2）純化菌株時(shí)劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。分析造成第二劃線區(qū)域的第一條線無菌落的可能原因是________________（答一點(diǎn)即可）。

（3）進(jìn)行梯度稀釋時(shí)的一般操作是將1mL菌液移入盛有9mL的無菌水中；常用稀釋涂布平板法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，其原理是_____________________，但統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往___________（填“多于”或“少于”)稀釋液中的活菌數(shù)，原因是__________________________。

Answer 1

【答案】硝基苯酚 其他兩組分別含有其他碳源，不能保證硝基苯酚是唯一碳源 接種環(huán)灼燒后未冷卻劃線（未從第一區(qū)域末端開始） 培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落來源于一個(gè)活菌 少于 有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡（個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成）

【解析】

微生物生長繁殖所必需的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，根據(jù)題意，欲從污水處理廠污泥中分離分解硝基苯酚的細(xì)菌，則需配制以硝基苯酚為唯一碳源的培養(yǎng)基；接種時(shí)常用接種環(huán)，平板劃線法要求灼熱的接種環(huán)冷卻后再劃線，否則會(huì)灼傷菌株甚至導(dǎo)致死亡。劃線時(shí)要從上一次劃線的末端開始劃線，這樣接種環(huán)上才有菌株。

（1）為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細(xì)菌，在配置培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇以硝基苯酚作為碳源，不采用其他兩組，原因是硝基苯酚+牛肉膏的培養(yǎng)基和硝基苯酚十葡萄糖的培養(yǎng)基都含有其他碳源，不能保證硝基苯酚是唯一碳源。

（2）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)，采用灼燒方法對其進(jìn)行滅菌，劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落，造成劃線無菌落可能的原因是接種環(huán)灼燒后未冷卻，或劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線。

（3）稀釋涂布平板法常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，其原理是培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落來源于稀釋液中的一個(gè)活菌，由于菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞形成，以及有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往少于稀釋液中的活菌數(shù)。