Question

【題目】回答與微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)有關(guān)的問題：

（1）在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的凝固劑，常用的是___________。

（2）為防止外來雜菌入侵，對__________等可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。

（3）如圖為平板劃線法接種后的示意圖。在劃線接種的整個(gè)操作過程中，對接種環(huán)至少需進(jìn)行________次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋，將平板_____放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的目的是______。

（4）為統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)液中細(xì)菌的數(shù)目，稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用涂布器涂勻，這種接種方法稱為_____。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)計(jì)對照組，其目的是______________________。

（5）篩選能分解纖維素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入_____________。

Answer 1

【答案】】瓊脂 玻璃器皿和金屬用具 6 倒置 避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā) 稀釋涂布平板法 判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（或“培養(yǎng)基滅菌是否合格”） 剛果紅

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min。

（1）制備固體培養(yǎng)基最常用的凝固劑是瓊脂。

（2）為防止外來菌入侵，需要進(jìn)行消毒滅菌，對耐高溫的需要保持干燥的物品如玻璃器皿和金屬用具等，可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。

（3）平板劃線接種過程中需在接種前、每次劃線后對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，圖中共接種5個(gè)區(qū)域，故接種環(huán)至少需要進(jìn)行6次灼燒滅菌處理。微生物培養(yǎng)過程中，易產(chǎn)生冷凝水，為防止水珠滴在培養(yǎng)基表面造成污染，培養(yǎng)時(shí)需將平板倒置。

（4）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)計(jì)對照組，在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，其目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。

（5）剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。