Question

3．如表是某同學列出的分離土壤中微生物培養(yǎng)基的配方數(shù)據(jù)表，據(jù)此回答下列問題：

培養(yǎng)基配方	含量
KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g
將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般都含有碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質．若用于培養(yǎng)乳酸菌，培養(yǎng)基中除上述營養(yǎng)物質外，還需要添加維生素．細菌能利用尿素作為氮源，是由于其能合成脲酶．
（2）在對分離的能分解尿素的細菌進行鑒定時，還需在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．接種前一般采取高壓蒸汽法對培養(yǎng)基進行滅菌．
（3）某同學在4個培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為10⁵的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為161、155、158、170個，則每毫升原土壤樣液中尿素分解菌的數(shù)量為1.61×10⁸．某同學在純化土壤中的尿素分解菌時，培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）．
（4）常采用甘油管藏法將純化得到的目的菌長期保存．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件．
2、無菌技術：消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

3、菌種保存

	臨時保存法	甘油管藏法
適用對象	頻繁使用的菌種	長期保存的菌種
培養(yǎng)及類型	固體斜面培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉移到新鮮培養(yǎng)基上	將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內保存
缺點	菌種易被污染或產生變異	\\

解答 解：（1）各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素．細菌能利用尿素作為氮源，是由于其能合成脲酶．
（2）在對分離的能分解尿素的細菌進行鑒定時，還需在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．對培養(yǎng)基進行滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法．
（3）某同學在4個培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為10⁵的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為161、155、158、170個，則每毫升原土壤樣液中尿素分解菌的數(shù)量為$\frac{161+155+158+170}{4}$×$\frac{1}{0.1}$×10⁵=1.61×10⁸．某同學在純化土壤中的尿素分解菌時，培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）．
（4）長期保存菌種常采用甘油管藏法．
故答案為：
（1）水和無機鹽       維生素        脲
（2）酚紅     高壓蒸汽法
（3）1.61×10⁸ 菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）
（4）甘油管藏

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法，掌握無菌技術；識記培養(yǎng)基的基本成分、種類及功能；識記菌種保藏的方法，能結合所學的知識準確答題．