Question

某研究性學習小組同學想了解車廂“拉環(huán)”細菌的種類與含量對公眾健康的影響，選擇了地鐵公交作為研究對象．他們設(shè)計了有關(guān)的實驗．
他們收集了有關(guān)的資料如下：
按照細菌對革蘭氏染色的反應(yīng)，可將細菌分為革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌．
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌均可生長，可用于細菌總數(shù)測定．麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，能抑制革蘭氏陽性菌生長，是革蘭氏陰性菌的選擇培養(yǎng)基．革蘭氏陰性菌能分解乳糖產(chǎn)生乳酸的菌落，其周圍pH值降低因而菌落為紅色，不能分解乳糖的菌落（通常為致病菌）為白色．
產(chǎn)乳酸的革蘭氏陰性菌常用來指示腸道細菌的存在，表明可能存在腸道病原體污染，其中既有非致病菌，也有致病菌．常將此類細菌作為監(jiān)測環(huán)境衛(wèi)生的指標．
《中華人民共和國國家標準---醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準GB15982-1995》規(guī)定，醫(yī)院普通病房、換藥治療室允許的總細菌數(shù)＜10cfu/cm²，即＜10個（菌落）/cm²．
（一）材料與方法．
1、取樣方法和過程：用浸有生理鹽水的棉球涂抹拉環(huán)后放入裝有3mL生理鹽水的試管，試管放置在盛有冰塊的冰盒內(nèi)條件下為宜，原因是

 

．采集樣品所用的生理鹽水、棉球、離心管等材料需作

 

處理．
2、細菌培養(yǎng)：將裝有取樣棉球的試管在振蕩器上劇烈振蕩5s，使細菌均勻分散于生理鹽水中．下列是細菌培養(yǎng)實驗過程，請在A、B（如圖）空格內(nèi)寫出相應(yīng)的操作內(nèi)容．細菌計數(shù)：培養(yǎng)48小時后，對培養(yǎng)皿進行菌落計數(shù)：

（1）在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落，計為

 

總數(shù)；
（2）在麥康凱培養(yǎng)基上的菌落，計為

 

總數(shù)．其中紅色菌落為

 

菌，白色菌落為

 

菌．
（二）結(jié)果與討論
地鐵拉環(huán)表面的平均細菌分布表（每個拉環(huán)手觸部分面積計為60cm²）：

項目	細菌數(shù)/拉環(huán)
平均細菌總數(shù)	532.4
單位面積平均細菌總數(shù)cfu/cm2	8.9
平均革蘭氏陰性菌總數(shù)	232.3
單位面積平均革蘭氏陰性菌總數(shù)cfu/cm2	3.9
單位面積平均乳糖發(fā)酵菌數(shù)cfu/cm2	2.1
單位面積平均非乳糖發(fā)酵菌數(shù)cfu/cm2	1.8
革蘭氏陰性菌占細菌總數(shù)比例	44%

討論：根據(jù)國家標準，參照上表數(shù)據(jù)，你可以得出什么結(jié)論？

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：解答本題需掌握：
（1）按照細菌對革蘭氏染色的反應(yīng)，可將細菌分為革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌．
（2）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌均可生長，可用于細菌總數(shù)測定．麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，能抑制革蘭氏陽性菌生長，是革蘭氏陰性菌的選擇培養(yǎng)基．革蘭氏陰性菌能分解乳糖產(chǎn)生乳酸的菌落，其周圍pH值降低因而菌落為紅色，不能分解乳糖的菌落（通常為致病菌）為白色．

解答： 解：（一）1、在取樣過程中，用浸有生理鹽水的棉球涂抹拉環(huán)后放入裝有3mL生理鹽水的試管，試管放置在盛有冰塊的冰盒內(nèi)條件下為宜，原因是減少取樣細菌分裂增殖，采集樣品所用的生理鹽水、棉球、離心管等材料需作高壓蒸汽滅菌．
2、由題意知，A、B處理分別是取等量菌液樣品涂布于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上和取等量菌液樣品涂布于麥康凱培養(yǎng)基上．
（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是通用培養(yǎng)基，不具有選擇作用，故統(tǒng)計的是細菌總數(shù)．
（2）麥康凱培養(yǎng)基具有選擇作用，故統(tǒng)計的是革蘭氏陰性菌落，其中紅色菌落為乳糖發(fā)酵菌，白色菌落為非乳糖發(fā)酵菌．
（二）由表可知，拉環(huán)單位表面積平均細菌總數(shù)有8.9 cfu/cm²，小于10 cfu/cm²，即＜10個（菌落）/cm²，單位面積平均革蘭氏陰性菌總數(shù)3.9cfu/cm²，乳糖發(fā)酵細菌2.1cfu/cm²，非乳糖發(fā)酵菌數(shù)1.8cfu/cm²，因此，可以認為地鐵總細菌含量相對較少，致病菌數(shù)量較少，對公眾安全不構(gòu)成威脅．
故答案為：
（一）1、減少取樣細菌分裂增殖    高壓蒸汽滅菌
2、A：取等量菌液樣品涂布于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上       B：取等量菌液樣品涂布于麥康凱培養(yǎng)基上
（1）細菌   
（2）革蘭氏陰性菌落    乳糖發(fā)酵    非乳糖發(fā)酵
（二）拉環(huán)單位表面積平均細菌總數(shù)有8.9 cfu/cm²，小于10 cfu/cm²，即＜10個（菌落）/cm²，單位面積平均革蘭氏陰性菌總數(shù)3.9cfu/cm²，乳糖發(fā)酵細菌2.1cfu/cm²，非乳糖發(fā)酵菌數(shù)1.8cfu/cm²，因此，可以認為地鐵總細菌含量相對較少，致病菌數(shù)量較少，對公眾安全不構(gòu)成威脅

點評：本題主要考查微生物的實驗室培養(yǎng)、實驗設(shè)計的相關(guān)知識，意在考查考查考生對相關(guān)知識的理解，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．