Question

Ⅰ．如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性金銀，BamHI、HindIII、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．

據(jù)圖回答：
（1）圖中將人乳蛋白基因插入載體，需用

 

限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含

 

的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是

 

（填字母代號(hào)）．
A．啟動(dòng)子    B．tet^R    C．復(fù)制原點(diǎn)     D．a(chǎn)mp^R
（3）過(guò)程①可采用的操作方法是

 

（填字母代號(hào)）．
A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化     B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化     C．顯微注射     D．細(xì)胞融合
（4）過(guò)程②可采用的生物技術(shù)是

 

．
（5）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體．這利用了細(xì)胞的

 

性．
（6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用

 

（填字母代號(hào)）技術(shù)．
A．核酸分子雜交     B．基因序列分析     C．抗原-抗體雜交     D．PCR
Ⅱ．某地區(qū)從1964年開(kāi)始使用殺蟲(chóng)劑殺滅蚊子幼蟲(chóng)，至1967年中期停用．如圖是五年間蚊子幼蟲(chóng)基因型頻率變化曲線．R表示殺蟲(chóng)劑抗性基因，S表示野生敏感型基因．據(jù)圖回答：

（1）R基因的出現(xiàn)是

 

的結(jié)果．
（2）在RR基因型頻率達(dá)到峰值時(shí)，RS、SS基因型頻率分別為4%和1%，此時(shí)R基因的頻率為

 

．
（3）1969年中期RR基因型幾近消失，表明在

 

的環(huán)境條件下，RR基因型幼蟲(chóng)比SS基因型幼蟲(chóng)的生存適應(yīng)能力

 

．
（4）該地區(qū)從此不再使用殺蟲(chóng)劑．預(yù)測(cè)未來(lái)種群中，最終頻率最高的基因型是

 

，原因是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),基因頻率的變化,胚胎移植

專題：

分析：分析題圖：圖示是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，包括基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟，其中過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；過(guò)程②需采用胚胎移植技術(shù)．
分析曲線圖：某地區(qū)從1964年開(kāi)始使用殺蟲(chóng)劑殺滅蚊子幼蟲(chóng)，RR基因型頻率逐漸升高，而RS和SS基因型頻率逐漸降低；1967年中期停用殺蟲(chóng)劑后，RR基因型頻率逐漸降低，而RS和SS基因型頻率逐漸升高．

解答： 解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaI的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會(huì)破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）啟動(dòng)子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列．
（3）過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，當(dāng)受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）過(guò)程②需要采用胚胎移植技術(shù)．
（5）胚胎分割技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性．
（6）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
Ⅱ．（1）基因突變是產(chǎn)生新基因的途徑，R為殺蟲(chóng)劑抗性基因，是基因突變產(chǎn)生的．
（2）RS、SS基因型頻率分別為4%、1%，則RR基因型頻率為95%，此時(shí)R基因的頻率=RR基因型頻率+

1

2

×RS基因型頻率=95%+2%=97%．
（3）1969年中期RR基因型幾近消失，表明在不在使用殺蟲(chóng)劑的環(huán)境條件下，RR基因型幼蟲(chóng)比SS基因型幼蟲(chóng)的生存適應(yīng)能力低．
（4）該地區(qū)從此不再使用殺蟲(chóng)劑后，在不適用殺蟲(chóng)劑環(huán)境下，持續(xù)的選擇作用使R基因頻率越來(lái)越低，因此未來(lái)種群中，最終頻率最高的基因型應(yīng)該是SS．
故答案為：
Ⅰ．（1）HindⅢ和BamHⅠ氨芐青霉素
（2）A
（3）C
（4）胚胎移植技術(shù)
（5）全能
（6）C
Ⅱ（1）基因突變
（2）97%
（3）不在使用殺蟲(chóng)劑   低
（4）SS   在不使用殺蟲(chóng)劑環(huán)境下，持續(xù)的選擇作用使R基因頻率越來(lái)越低

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合乳腺生物反應(yīng)器培育過(guò)程圖和曲線圖，考查基因工程、胚胎工程、基因頻率的變化及生物進(jìn)化等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具和操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱或采用的技術(shù)；識(shí)記胚胎分割技術(shù)的理論基礎(chǔ)；掌握基因頻率的相關(guān)計(jì)算方法，能提取圖中有效信息答題．