Question

【題目】下圖表示培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線(xiàn)。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線(xiàn)所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有_____________(答出兩點(diǎn)即可)。圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用____和____限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是____。

(2)過(guò)程①可采用的操作方法是________。

(3)對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割,經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體,這利用了細(xì)胞的______性。

(4)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá),可采用________技術(shù)。

Answer 1

【答案】 能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn) Hind Ⅲ BamHⅠ 啟動(dòng)子 顯微注射法 全能 抗原-抗體雜交

【解析】分析題圖，圖示是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線(xiàn)，包括基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟，其中過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；過(guò)程②需采用胚胎移植技術(shù)。

（1）質(zhì)粒作為運(yùn)載體，應(yīng)具備的基本條件有：能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、能啟動(dòng)外源目的基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)等。質(zhì)粒上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ的切割位點(diǎn)，外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ。重組質(zhì)粒上的啟動(dòng)子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列。

（2）根據(jù)以上分析已知，過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞（受精卵），常用顯微注射法。

（3）胚胎分割技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。

（4）目的基因成功表達(dá)的產(chǎn)物是人乳鐵蛋白，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。