Question

酵母菌生長的最適宜溫度在20℃～30℃之間，能在pH為3～7.5的范圍內(nèi)生長，在氧氣充足的環(huán)境中主要以出芽生殖的方式快速增殖，大約每1.5～2 h增殖一代。某研究性學習小組據(jù)此探究酵母菌種群在不同的培養(yǎng)液濃度和溫度條件下種群密度的動態(tài)變化，進行了如下實驗，實驗操作步驟如下：

第一步：配制無菌馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液，活化酵母菌液。

第二步：利用相同的多套裝置，按下表步驟操作。

裝置編號		A	B	C	D
裝置容器 內(nèi)的溶液	無菌馬鈴薯葡萄糖 培養(yǎng)液/mL	10	10	5	5
	無菌水/mL	－	－	5	5
	活化酵母菌液/mL	0.1	0.1	0.1	0.1
溫度(℃)		5	25	5	25

 

 

 

第三步：用血球計數(shù)板計數(shù)裝置中起始的酵母菌數(shù)目，做好記錄。

第四步：將各裝置放在條件相同且適宜的條件下培養(yǎng)。

第五步：連續(xù)7天，每天隨機抽時間取樣計數(shù)，做好記錄。

回答下列問題：

(1)改正實驗操作步驟中的一處錯誤_______________________________。

(2)某同學第5天在使用血球計數(shù)板計數(shù)時的做法如下：

①振蕩搖勻試管中的培養(yǎng)液，取1 mL并適當稀釋(稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液)。

②先將________放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液________，制作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察計數(shù)：在觀察計數(shù)時只計算________(被、不被)染成藍色的酵母菌。

(3)如所使用的血球計數(shù)板有16個中方格，每1中方格中有25個小方格，每1個小方格的容積為0.1 mm³(1 mL＝1000 mm³)。請推導出1 mL培養(yǎng)液中酵母菌細胞的計算公式：酵母細胞個數(shù)/mL＝________。

 

Answer 1

(1)第五步中應每天同一時間(定時)取樣

(2)②蓋玻片　用濾紙(吸水紙)吸去�、鄄槐�

(3)平均每個小方格的酵母菌數(shù)×400×10⁴×稀釋倍數(shù)