Question

【題目】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在動(dòng)物細(xì)胞工程的其他技術(shù)中都得廣泛應(yīng)用（如圖）．下面是與動(dòng)物細(xì)胞工程相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)分析回答：
（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用處理，以分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞必需的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度和pH條件，還要提供無(wú)菌、無(wú)毒和適宜的氣體環(huán)境．為達(dá)到無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境條件，除了要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒外，還要① ， ② ． 氣體環(huán)境中CO2的作用是 ．
（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，原因是 ．
（4）如圖表示單克隆抗體的制備過(guò)程，給小鼠注射特定抗原后產(chǎn)生的、與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是 ． 在細(xì)胞融合的過(guò)程中，常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是；篩選出的雜交瘤細(xì)胞所表現(xiàn)出的優(yōu)良性狀是 ．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）
（2）在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液；維持培養(yǎng)液的PH
（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）
（4）B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）；聚乙二醇（PEG）；可在體外條件下，無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體
【解析】解：（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，動(dòng)物組織需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液．（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境條件，可采用對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒、在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的PH．（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)），因此在核移植技術(shù)中供體細(xì)胞一般選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞．（4）在單克隆抗體的制備過(guò)程中，給小鼠注射特定抗原后，產(chǎn)生的具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞），常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）與骨髓瘤細(xì)胞融合．篩選出的雜交瘤細(xì)胞具有在體外條件下無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體的優(yōu)良性狀． 所以答案是：（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）（2）①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素�、诙ㄆ诟鼡Q培養(yǎng)液、維持培養(yǎng)液的PH（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）（4）B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）　聚乙二醇（PEG）可在體外條件下，無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體
【考點(diǎn)精析】關(guān)于本題考查的動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程和單克隆抗體的制備，需要了解取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)；對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提��；促使它們細(xì)胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體才能得出正確答案．