Question

【題目】(1)利用_________法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。進行細菌純化培養(yǎng)過程中，經(jīng)過培養(yǎng)之后，可以觀察到在_____（填圖中編號）區(qū)域出現(xiàn)單個菌落，產(chǎn)生該菌落的最初細菌數(shù)目一般有_________個細菌。將乳酸菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上，要使其正常生長必須給予的條件是_____。所有這些操作均為無菌操作，其目的是_____。

(2)該接種法使用的工具是_____。

A. B. C. D.

(3)該工具最合適的滅菌方法是_________。

A．火焰灼燒 B．高溫高壓滅菌 C．酒精擦拭 D．紫外線照射

(4)下表是以大腸桿菌培養(yǎng)基的配方。

成分	蛋白胨	牛肉膏	NaCl	蒸餾水	pH
含量	10g	5g	10g	1000ml	7.0

上述表格中各項成分能起生長因子作用的是_____；能提供氮源的是_____。

(5)請按照正確的順序排列配制培養(yǎng)基的步驟_____。

①倒置培養(yǎng)基 ②計算 ③熔化 ④稱量 ⑤滅菌

Answer 1

【答案】平板劃線 ③ 1 無氧環(huán)境 防止雜菌污染 A A 牛肉膏 牛肉膏、蛋白胨 ②④③⑤①

【解析】

1、平板劃線的操作的基本步驟是：

（1）右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰并塞上棉塞。

（2）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。

（3）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。

（4）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

3、無菌操作技術(shù)包括消毒和滅菌

（1）圖1中采用的接種方法是平板劃線法，該方法可以把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，隨著劃線的進行，菌落數(shù)越來越少，因此經(jīng)過培養(yǎng)之后，可以觀察到在3區(qū)域出現(xiàn)單個菌落；菌落是由一個細菌繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，因此產(chǎn)生該菌落的最初細菌數(shù)目是1個；乳酸菌屬于厭氧菌，因此將乳酸菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上，要使其正常生長必須給予的條件是無氧環(huán)境，無菌操作的目的是防止雜菌污染。

（2）平板劃線法采用的接種工具是接種環(huán)。

故選A。

（3）微生物的接種工具常用灼燒滅菌法滅菌。

故選A。

（4）微生物的營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子，表格中為其提供生長因子的是牛肉膏；提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。

（5）培養(yǎng)基的配置的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板后要倒置培養(yǎng)基。