Question

19．請回答利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的相關(guān)問題：
（1）先從人體胰島β細(xì)胞中獲取控制人胰島素合成的mRNA，然后在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下合成人胰島素基因．
（2）構(gòu)建重組DNA分子通常需要相同的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶使兩者連接在一起．
（3）大腸桿菌的細(xì)胞壁會阻礙重組DNA進(jìn)入細(xì)胞，通常使用氯化鈣處理大腸桿菌．
（4）為檢測目的基因是否在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達(dá)，最簡單有效的方法是D（A．檢測大腸桿菌中有無人胰島素基因B．檢測培養(yǎng)基中葡萄糖濃度C．檢測大腸桿菌中人胰島素基因mRNA含量D．檢測培養(yǎng)基中胰島素含量）．人胰島素基因能在大腸桿菌中表達(dá)是因?yàn)槿撕痛竽c桿菌共用一套遺傳密碼．
（5）胰島素除了用于治療糖尿病之外，還可以用來提高動物細(xì)胞克隆形成率．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）胰島素基因只在胰島β細(xì)胞中表達(dá)，因此可從胰島β細(xì)胞中獲取控制人胰島素合成的mRNA，然后在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下合成人胰島素基因．
（2）構(gòu)建重組DNA分子通常需要相同的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶使兩者連接在一起．
（3）大腸桿菌的細(xì)胞壁阻礙會重組DNA進(jìn)入細(xì)胞，通常使用氯化鈣處理大腸桿菌，增大細(xì)胞壁的通透性，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中的感受態(tài)．
（4）胰島素基因表達(dá)的產(chǎn)物是胰島素，因此為檢測目的基因是否在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達(dá)，最簡單有效的方法是檢測培養(yǎng)基中胰島素含量．人胰島素基因能在大腸桿菌中表達(dá)是因?yàn)槿撕痛竽c桿菌共用一套遺傳密碼．
（5）胰島素可以促進(jìn)細(xì)胞攝取和利用葡萄糖，提高細(xì)胞活性，因此可以用來提高動物細(xì)胞克隆形成率．
故答案為：
（1）胰島β     逆轉(zhuǎn)錄      
（2）相同     
（3）細(xì)胞壁
（4）D    一套遺傳密碼      
（5）細(xì)胞克隆

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．