Question

【題目】民間傳統(tǒng)酒曲中含有大量的微生物，現(xiàn)進行下述實驗分離酒曲中的主要微生物。

實驗一：將酒曲制成懸液后，分別取不同稀釋度的酒曲懸液接種到GPDA培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后根據(jù)每個平板的菌落特征，統(tǒng)計不同微生物的菌落數(shù)，發(fā)現(xiàn)酒曲中主要有兩類微生物，即酵母菌和霉菌。

（1）上述操作過程中的接種方法是______________。

（2）根據(jù)菌落特征鑒別微生物時，能夠觀察的菌落特征有_____________（多選）。

A．形狀 B．顏色 C．隆起程度 D．大小

實驗二：在液體中，酵母菌比霉菌生長快；而酸性培養(yǎng)基中酵母菌比細菌生長更適宜。下述方案將酵母菌從酒曲中進行了分離。用小刀切開曲塊，挖取米粒大小一塊投入酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中，然后置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩天。

（1）酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液的成分包括黃豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物質(zhì)主要是___

（2）上述實驗操作中，需要滅菌的有_______________________。

實驗三：取渾濁的培養(yǎng)液1mL轉(zhuǎn)接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中并培養(yǎng)，如此重復(fù)多次。多次轉(zhuǎn)接后，取稀釋液用圖所示方法接種在蔗糖豆芽汁平板上。

（1）圖中所用接種方法是____________________。

（2）與酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培養(yǎng)基中少了乳酸，多了瓊脂。這種成分改變的原因是：_________________________________________________________

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法 ABCD 蔗糖、乳酸（黃豆芽） 小刀、培養(yǎng)液 平板劃線法 利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過平板劃線法要分離酵母菌，此操作要在固體培養(yǎng)基上進行，因此需加瓊脂

【解析】

純化菌種時常采用稀釋涂布平板法和平板劃線法得到單菌落。菌落是指由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。不同菌體形成的菌落特征不同，菌落特征包括：①菌落的形狀、②菌落的大小、④隆起程度、⑤菌落顏色等。

實驗一：

（1）根據(jù)“將酒曲制成懸液后，分別取不同稀釋度的酒曲懸液接種到GPDA培養(yǎng)基上”說明上述微生物的接種方法為稀釋涂布平板法。

（2）不同菌體形成的菌落特征不同，根據(jù)上述分析可知，菌落特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面，故ABCD均符合題意。

實驗二：

（1）酵母菌屬于異養(yǎng)微生物，所需要的碳源是有機碳，碳源同時也是酵母菌的能源物質(zhì)，酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中的黃豆芽、蔗糖、乳酸和水中能為酵母菌提供碳源的有蔗糖、乳酸（黃豆芽）。

（2）實驗過程中所使用的小刀、培養(yǎng)液均需要經(jīng)過滅菌，以防止雜菌污染。

實驗三：

（1）圖中平板上是連續(xù)劃線，所以使用的接種方法為平板劃線法。

（2）由于利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過平板劃線法要分離酵母菌，此操作要在固體培養(yǎng)基上進行，因此加瓊脂，與酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培養(yǎng)基中少了乳酸，多了瓊脂。