Question

9．在“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化”的實(shí)驗(yàn)中：
（1）對酵母菌進(jìn)行計數(shù)可以采用抽樣檢測的方法，如果實(shí)驗(yàn)時發(fā)現(xiàn)血球計數(shù)板的一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取的措施是適當(dāng)稀釋菌液．
（2）為探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化，一組同學(xué)進(jìn)行了如下操作．其中操作步驟不正確的有②③ （填下列操作的序號）．
①將適量干酵母放入裝有一定濃度葡萄糖溶液的錐形瓶中，在適宜條件下培養(yǎng)；
②靜置一段時間后，用吸管從錐形瓶中吸取培養(yǎng)液；
③在血球計數(shù)板中央滴一滴培養(yǎng)液，蓋上蓋玻片；
④用濾紙吸除血球計數(shù)板邊緣多余培養(yǎng)液；
⑤將計數(shù)板放在載物臺中央，待酵母菌沉降到計數(shù)室底部，在顯微鏡下觀察、計數(shù)．
（3）某同學(xué)為探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，設(shè)計了3組實(shí)驗(yàn)（見表）．每隔24小時取樣并計數(shù)．

試管編號	培養(yǎng)液（mL）	無菌水（mL）	酵母菌母液（mL）	溫度（℃）
A	10	--	0.1	28
B	10	--	0.1	5
C	--	10	0.1	28

①請寫出該同學(xué)研究的課題名稱：探究溫度、營養(yǎng)物質(zhì)對酵母菌種群動態(tài)變化的影響．
②用顯微鏡定期檢測酵母菌數(shù)目，如果A管中的10mL酵母液在適宜溫度下培養(yǎng)，在不同時間內(nèi)等量均勻取樣4次，分別測定樣品中酵母菌的數(shù)量和pH值，結(jié)果如表所示．表中樣品的取樣先后次序?yàn)?→4→1→3，若第5次均勻取樣時，樣品中的酵母菌數(shù)量為760個/立方毫米，產(chǎn)生這一結(jié)果的原因是營養(yǎng)物質(zhì)消耗，有害代謝產(chǎn)物積累，造成酵母菌的出生率小于死亡率．

樣品	酵母菌數(shù)量（個/mm3）	PH
1	1210	4.8
2	820	5.4
3	1210	3.7
4	1000	5.0

Answer 1

分析 采用抽樣檢測法使用血球計數(shù)板對酵母菌進(jìn)行計數(shù)，在計數(shù)時應(yīng)從以下幾方面注意：
1、每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天．
2、從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差�。�
3、如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計數(shù)．
4、對于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線的原則處理，另兩邊不計數(shù)．
5、計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的平均數(shù)值來計算，對每個樣品可計數(shù)三次，再取其平均值．計數(shù)時應(yīng)不時地調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體．按公式計算每mL（或10mL）菌液中所含的酵母菌個數(shù)．
6、血球計數(shù)板的清潔．血球計數(shù)板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥．通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物．若不干凈，則必須重復(fù)清洗直到干凈為止．

解答 解：（1）對酵母菌進(jìn)行計數(shù)可采用抽樣檢測法；若血球計數(shù)板的一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)適當(dāng)稀釋菌液，最后計數(shù)的結(jié)果需乘以稀釋的倍數(shù)．
（2）①將適量干酵母菌放入裝有一定濃度葡萄糖溶液的錐形瓶中，在適宜條件下培養(yǎng)，能進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，①正確；
②吸取培養(yǎng)液計數(shù)前要將試管輕輕振蕩幾次，目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，減少誤差，②錯誤；
③利用血細(xì)胞計數(shù)板時，應(yīng)先放置蓋玻片，在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液，待培養(yǎng)液從邊緣處自行滲入計數(shù)室，吸去多余培養(yǎng)液，再進(jìn)行計數(shù)，③錯誤；
④用濾紙吸除血球計數(shù)板邊緣多余培養(yǎng)液，④正確；
⑤血球計數(shù)板加樣后，需靜置片刻再使用顯微鏡計數(shù)．這是因?yàn)橛嫈?shù)室中的菌懸液有一定的高度（0.1mm），需要讓細(xì)胞沉降到計數(shù)室底部的網(wǎng)格線中，避免細(xì)胞分布在不同液層深度，導(dǎo)致計數(shù)時被遺漏，⑤正確．
故選：②③．
（3）①根據(jù)表格數(shù)據(jù)可知，該實(shí)驗(yàn)的自變量是溫度和營養(yǎng)物質(zhì)，因此該實(shí)驗(yàn)的課題名稱是：探究溫度、營養(yǎng)物質(zhì)對酵母菌種群動態(tài)變化的影響．
②由于酵母菌在發(fā)酵過程中產(chǎn)生二氧化碳，因此培養(yǎng)液的PH會不斷下降，因此根據(jù)PH值變化可以確定表中樣品的取樣先后次序?yàn)?、4、1、3．若第5次均勻取樣時，樣品中的酵母菌數(shù)量為760個/立方毫米，產(chǎn)生這一結(jié)果的原因是營養(yǎng)物質(zhì)消耗，有害代謝產(chǎn)物積累，造成酵母菌的出生率小于死亡率．
故答案為：
（1）抽樣檢測      適當(dāng)稀釋菌液
（2）②③
（3）①溫度、營養(yǎng)物質(zhì)     ②2→4→1→3 　　營養(yǎng)物質(zhì)消耗，有害代謝產(chǎn)物積累

點(diǎn)評 本題考查了探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)的有關(guān)知識，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)步驟等；還要求考生掌握探究實(shí)驗(yàn)的原則，對實(shí)驗(yàn)進(jìn)行修善，并能根據(jù)題干中的信息答題．