Question

16．木聚糖酶系可以將半纖維素（一種多糖）轉(zhuǎn)化為單細(xì)胞蛋白其他有用物質(zhì)．有些嗜熱菌能產(chǎn)生耐熱木聚糖酶，在食品工業(yè)上具有較高的潛在應(yīng)用價(jià)值．現(xiàn)欲從溫泉中分離能分解半纖維素的嗜熱菌，并從中篩選木聚糖酶高產(chǎn)菌株，獲得耐熱木聚糖酶．回答下列問題：
（1）取適量體積的樣品涂布在富含半纖維素的固體培養(yǎng)基上，置于65℃（原因是此溫度是嗜熱菌生活的適宜溫度）的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，菌落長(zhǎng)出后，挑取單個(gè)菌落在培養(yǎng)基上用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)，進(jìn)行菌株的分離純化．將得到的菌株接種到液體（固體/液體）培養(yǎng)基中富集．
（2）將富集后的菌株接種于固體培養(yǎng)基上，待菌落長(zhǎng)出后用0.1%的剛果紅溶液染色1h，再用lmol/L NaCl脫色．菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈，篩選透明圈（直徑）大的菌落即為木聚糖酶高產(chǎn)菌株．

Answer 1

分析 1、分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理：
①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶．纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)．
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）要從溫泉中分離能分解半纖維素的嗜熱菌，應(yīng)該選用以半纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基；嗜熱菌生活的適宜溫度是65℃，因此應(yīng)該置于65℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；進(jìn)行菌株的分離純化時(shí)，常用的接種方法為平板劃線法或稀釋涂布平板法；將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中富集．
（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．透明圈越大，說明分解能力越強(qiáng)，因此篩選透明圈（直徑）大的菌落即為木聚糖酶高產(chǎn)菌株．
故答案為：
（1）半纖維素      嗜熱菌生活的適宜溫度   平   板劃線法或稀釋涂布平板      分離純化      液體
（2）剛果紅溶液   透明圈      透明圈（直徑）大

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查纖維素分解菌的篩選與分離即培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在強(qiáng)化學(xué)生相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的分析和理解能力．