Question

8．人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備的抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷．如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題．

（1）先給小鼠注射HCG，一段時(shí)間后，若小鼠血清中檢測(cè)的抗HCG的抗體，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了體液免疫反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮钠⑴K中獲取B淋巴細(xì)胞．將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，使用的不同于植物原生質(zhì)體融合的方法是滅活的病毒．
（2）將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取有克隆生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)孔中的上清液（填“上清液”或“沉淀細(xì)胞”），應(yīng)用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)．經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（3）培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)，若開始培養(yǎng)時(shí)取一滴培養(yǎng)液觀察有100個(gè)細(xì)胞，經(jīng)24h培養(yǎng)后，取一滴稀釋100倍后再取一滴（設(shè)三次的“一滴”等量）觀察，發(fā)現(xiàn)有64個(gè)細(xì)胞，則此細(xì)胞的細(xì)胞周期約為4h．
（4）已知癌基因X過(guò)量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組（實(shí)驗(yàn)組）細(xì)胞培養(yǎng)液中加入一定量的Y，B組（對(duì)照組）細(xì)胞培養(yǎng)液中加入等量生理鹽水，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過(guò)分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的蛋白質(zhì)合成水平的差異，確定Y的藥效．

Answer 1

分析 （1）單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體．具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)．
（2）單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（3）單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)．②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”．

解答 解：（1）給小鼠注射HCG，一段時(shí)間后，若小鼠血清中檢測(cè)的抗HCG的抗體，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了體液免疫反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮钠⑴K中獲取B淋巴細(xì)胞．將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，使用的不同于植物原生質(zhì)體融合的方法是滅活的病毒．
（2）由于抗體主要分布在上清液中，因此用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞并收集上清液．應(yīng)用相關(guān)技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)．經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（3）根據(jù)題意分析可知：一滴培養(yǎng)液觀察有100個(gè)腫瘤細(xì)胞，經(jīng)24h培養(yǎng)后，取一滴稀釋100倍后再取一滴（設(shè)三次的“一滴“等量）觀察，發(fā)現(xiàn)有64個(gè)腫瘤細(xì)胞，這句話可以看作，1個(gè)細(xì)胞經(jīng)24小時(shí)繁殖成為64個(gè)，那么繁殖了6次，2的6次方是64，所以24小時(shí)共有6個(gè)周期，一個(gè)周期為4小時(shí)．
（4）該實(shí)驗(yàn)的目的是試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，因此自變量為是否加入Y，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入等量生理鹽水，則A組細(xì)胞培養(yǎng)液中應(yīng)加入等量Y．已知基因X表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，而基因X的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟，抗癌藥物Y的作用可能是抑制基因X的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，也可能是抑制其翻譯過(guò)程，因此通過(guò)分別檢測(cè)基因X在A、B兩組細(xì)胞中的mRNA或相關(guān)蛋白質(zhì)合成水平的差異，可以確定Y的藥效．
故答案為：
（1）體液免疫   脾臟   骨髓瘤    滅活的病毒
（2）上清液 抗原-抗體雜交
（3）4
（4）Y     等量生理鹽水    蛋白質(zhì)（mRNA）

點(diǎn)評(píng) 本題考查了制備單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問(wèn)題的能力．