Question

【題目】鯨死亡后會沉入海底，俗稱“鯨落”。“鯨落”后期會形成一個以厭氧菌和硫細菌等為主體的生態(tài)系統(tǒng)。厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，同時產(chǎn)生一些硫化氫等硫化物。硫細菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機物。請回答相關(guān)問題：

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般都會含有水、無機鹽、氮源和碳源，培養(yǎng)“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是______________。要培養(yǎng)硫細菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在_________________________，這種培養(yǎng)基可以用來專一性培養(yǎng)硫細菌，所以稱為__________________培養(yǎng)基。

（2）在分離“鯨落”中的微生物時要制備固體培養(yǎng)基，在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是______

（3）科學(xué)家欲研究死鯨的遺傳屬性，在“鯨落”中提取到了死鯨的DNA,然后可以用________技術(shù)對其DNA進行擴增，在擴增死鯨DNA的過程中，除了要加入死鯨的DNA作模板外，還需要加入_________________________（至少答兩種）等物質(zhì)。

（4）為了研究“鯨落”中含有微生物的情況，需將“鯨落”提取物加水稀釋，然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，這種方法稱為_______________________。下面所示的四種菌落分布情況中，不可能由該方法得到的是___________。

Answer 1

【答案】含碳有機物（或脂肪） 碳源必須是含碳無機物（或碳酸鹽），同時加入硫化物 選擇 防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)皿表面的水分更好地揮發(fā)（防止細菌透過皿低、皿蓋的縫隙，落在培養(yǎng)基上） PCR 引物、耐高溫的DNA聚合酶、四種脫氧核苷酸 稀釋涂布平板法 D

【解析】

微生物生長所需要營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水和無機鹽等，對于異養(yǎng)微生物，需要添加有機碳源。自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)不需要添加含碳有機物。選擇培養(yǎng)基是人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基。微生物接種的方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（1）厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，屬于異養(yǎng)微生物，故培養(yǎng)“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是含碳有機物（或脂肪）。硫細菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機物，即硫細菌為自養(yǎng)生物，所以要培養(yǎng)硫細菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在碳源必須是含碳無機物（或碳酸鹽），同時加入硫化物。這種人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。

（2）在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)皿表面的水分更好地揮發(fā)（防止細菌透過皿低、皿蓋的縫隙，落在培養(yǎng)基上）。

（3）用PCR技術(shù)可實現(xiàn)對DNA的體外擴增。PCR擴增的條件為DNA模板、引物、耐高溫的DNA聚合酶、四種脫氧核苷酸。

（4）使用涂布器涂布的接種微生物的方法為稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法接種的微生物會在培養(yǎng)基上形成均勻分布的菌落，而平板劃線法接種的微生物在劃線的起始部分菌落連在一起生長，由圖可知，A、B、C均形成了均勻分布的單個菌落，屬于稀釋涂布平板法接種的，而D中菌落是連在一起生長的，是通過平板劃線法接種的，所以D符合題意，ABC不符合題意。

故選D。