Question

【題目】科技人員將人的干擾素基因導入大腸桿菌中并大規(guī)模培養(yǎng)，以提取干擾素用于制藥。回答下列問題：

（1）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，cDNA中__________(填“有”或“沒有”)啟動子。獲得的目的基因可通過_________技術大量擴增，進行擴增的前提是___________。

（2）為使干擾素基因在大腸桿菌中高效表達，應將擴增后的干擾素基因片段正確插入載體的________和終止子之間，終止子的作用是_________________。

（3）檢測人的干擾素基因在大腸桿菌中是否轉錄，用_______________作為探針進行檢測。

Answer 1

【答案】 沒有 PCR 要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物 啟動子 使轉錄在所需要的地方停止 放射性同位素標記的目的基因

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術

（1）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，其屬于部分基因文庫，cDNA中不含啟動子；獲得的目的基因可以通過PCR技術大量擴增，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成引物。

（2）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因，其中啟動子位于目的基因的首端，啟動轉錄過程，終止子位于目的基因的尾端，終止轉錄過程，因此目的基因必須插入兩者之間才能正確表達。

（3）檢測目的基因是否轉錄，應該檢測其轉錄的產物RNA，一般用分子雜交技術，即用放射性同位素標記的目的基因探針進行檢測。