Question

3．某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學(xué)生的勞動技術(shù)課內(nèi)容。首先對食用菌實驗室進行清掃和消毒處理，準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題：

(1)對買回來的菌種進行擴大培養(yǎng)，首先制備試管培養(yǎng)基，寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料：__________、__________、__________、__________、__________。其中提供氮源的是__________；提供碳源的主要物質(zhì)是__________________。

(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時各成分要有合適的__________。在燒杯中加入瓊脂后要不停地__________，防止__________。

(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入__________中滅菌，壓力__________kPa，溫度__________，時間__________。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0時，將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)______________________。

(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時注意，先向鍋內(nèi)倒入__________。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。

(5)從一支試管向另一支試管接種時注意，接種環(huán)要在酒精燈__________(填“內(nèi)”或“外”)焰滅菌，并且待接種環(huán)__________后蘸取菌種，試管口不能離開酒精燈火焰附近，將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長成菌落后放入__________℃冰箱中保存。

Answer 1

答案：(1)牛肉膏　蛋白胨　水　無機鹽　瓊脂　蛋白胨、牛肉膏　牛肉膏

(2)比例　攪拌　瓊脂糊底引起燒杯破裂

(3)高壓蒸汽滅菌鍋　100　121 ℃　15～30 min　廢棄

(4)適量水　(5)外　冷卻　4

解析：本題主要考查對食用菌菌種擴大培養(yǎng)并保存的過程中涉及的培養(yǎng)基配制、滅菌及菌種轉(zhuǎn)移和保藏的一些基礎(chǔ)知識。

(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	蒸餾水
5.0 g	10.0 g	5.0 g	20.0 g	定容至1 000 mL

由配方可知所需的原料；凡能提供所需氮元素的物質(zhì)為氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。

(2)在配制培養(yǎng)基時營養(yǎng)要協(xié)調(diào)，按所培養(yǎng)微生物對各種成分的需求確定；在加入瓊脂后，要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。

(3)玻璃器皿的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌，在壓力為100 kPa、溫度為121 ℃條件下，滅菌15～30 min。若棉塞上沾有培養(yǎng)基，易被雜菌污染，應(yīng)作廢。

(4)不加水，無從談起高壓蒸汽，還有可能損壞設(shè)備。

(5)酒精燈外焰溫度高，滅菌效果好。灼燒后待冷卻再蘸取菌種，否則會燙死菌種造成實驗失敗。