Question

【題目】（1）癌癥是威脅人類健康的最嚴(yán)重的疾病之一。細(xì)胞癌變后，細(xì)胞表面的糖蛋白減少，使細(xì)胞粘著性降低，但增加了一些癌細(xì)胞特有的蛋白成分，所以可用 的方法來(lái)鑒定細(xì)胞是否癌變。

（2）丹參酮是從中藥丹參中提取的具有抗腫瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用機(jī)制之一是誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。以下是相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程及結(jié)果：

①將等量的人肝癌細(xì)胞（HepG2）懸液，分別接種于若干含有等量培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中；將培養(yǎng)瓶放于37℃、 （氣體條件）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，靜置、去掉上清液；

②實(shí)驗(yàn)組用0．02%二甲亞砜溶解的0．5ug/mL、1ug/mL、1．5ug/mL的丹參酮溶液，對(duì)照組用 ，再加入等量的培養(yǎng)液，在適宜環(huán)境條件下中繼續(xù)培養(yǎng)；

③培養(yǎng)72h，每24h用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)癌細(xì)胞數(shù)。本實(shí)驗(yàn)的自變量是 。為減少誤差，實(shí)驗(yàn)中每組細(xì)胞培養(yǎng)瓶不止一個(gè)，統(tǒng)計(jì)每組各瓶數(shù)據(jù)并 。

（3）設(shè)對(duì)照組癌細(xì)胞增殖率為100%，用下面公式計(jì)算各用藥組癌細(xì)胞增殖率：增殖率（%）=[（用藥組各時(shí)段癌細(xì)胞數(shù)一用藥組開始癌細(xì)胞數(shù)）/（對(duì)照組各時(shí)段癌細(xì)胞數(shù)一對(duì)照組開始癌細(xì)胞數(shù)）]×100。得到以下數(shù)據(jù)：

組別		培養(yǎng)時(shí)間（小時(shí)）
		24	48	72
對(duì)照組		100	100	100
給藥組 Ug/mL	0．5	78	62	48
	1．0	68	36	21
	1．5	48	12	5

通過(guò)數(shù)據(jù)分析可以得出丹參酮對(duì)HepG2細(xì)胞的作用效果的特點(diǎn)是： 。

（4）將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心，去除上清液后經(jīng)過(guò)一系列的處理及分析，得到對(duì)照組和給藥組48h細(xì)胞周期變化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達(dá)量如表2所示：

組別	G1	S	G2+M	凋亡率	Bax	Bcl-2
對(duì)照組（%）	55	36	9	5．6	28	53
實(shí)驗(yàn)組（%）	67	24	9	32．6	37	38

據(jù)此推測(cè)，丹參酮使HepG2細(xì)胞周期阻滯于 期。丹參酮可能通過(guò)促進(jìn)HepG2內(nèi)的

表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。

（5）順鉑（DDP）是一種DNA損傷藥物，也是目前臨床上多種癌癥化療的首選藥物。若要探究丹參酮聯(lián)合順鉑對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，除了上述丹參酮給藥組外，還應(yīng)設(shè)置

等給藥組才能得出結(jié)論。

Answer 1

【答案】（共15分）（1）抗原-抗體雜交

（2）①5%的二氧化碳和95%的空氣 ②等量的0．02%二甲亞砜溶液 丹參酮的濃度與作用時(shí)間 求平均值

（3）丹參酮濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用越強(qiáng)；作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用越強(qiáng)

（4）G1 Bax基因

（5）順鉑用藥組和丹參酮聯(lián)合順鉑用藥組

【解析】（1）鑒定癌細(xì)胞特有的蛋白成分，可采用抗原-抗體雜交的方法。

（2）①在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常將培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶至于含5%的二氧化碳和95%的空氣的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

②實(shí)驗(yàn)組用0．02%二甲亞砜溶解的0．5ug/mL、1ug/mL、1．5ug/mL的丹參酮溶液，為了保證單一變量原則，且排除溶劑的作用，對(duì)照組應(yīng)用等量的0．02%二甲亞砜溶液。

③由題意“用0．02%二甲亞砜溶解的0．5ug/mL、1ug/mL、1．5ug/mL的丹參酮溶液”和“培養(yǎng)72h，每24h用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)癌細(xì)胞數(shù)”可知，本實(shí)驗(yàn)的自變量是丹參酮的濃度與作用時(shí)間。為了減少實(shí)驗(yàn)誤差，在實(shí)驗(yàn)中，每組細(xì)胞培養(yǎng)瓶應(yīng)不止一個(gè)，在統(tǒng)計(jì)每組各瓶數(shù)據(jù)后需求平均值。

（3）表中信息顯示：癌細(xì)胞的增殖率隨著丹參酮濃度的增大和培養(yǎng)時(shí)間的遞增而逐漸減小，說(shuō)明丹參酮濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用越強(qiáng)；丹參酮作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用越強(qiáng)。

（4）分析表格信息可知：實(shí)驗(yàn)組的G1期細(xì)胞比例增多，S期細(xì)胞的比例減少，據(jù)此可推測(cè)：丹參酮使HepG2細(xì)胞周期阻滯于G1期。表中信息還顯示：實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡率增加，凋亡蛋白Bax的表達(dá)量也增多，據(jù)此可推測(cè)：丹參酮可能通過(guò)促進(jìn)HepG2內(nèi)的bax基因表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。

（5）若要探究丹參酮聯(lián)合順鉑對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，應(yīng)還需設(shè)置順鉑用藥組和丹參酮聯(lián)合順鉑用藥組給藥組才能得出結(jié)論。