Question

人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選．利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示（注：基因B為高血壓相關(guān)基因）．

（1）進(jìn)行①過(guò)程之前，需對(duì)人工采集的精子進(jìn)行

 

處理．完成②過(guò)程常采用的方法是

 

，④過(guò)程中，為了防止污染，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的

 

．
（2）從人體細(xì)胞中獲取基因B時(shí)用到的工具酶是

 

，在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，高血壓相關(guān)基因的首端必須有

 

，它是RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合部位．
（3）圖示中甲為

 

（時(shí)期）的去核卵母細(xì)胞，⑤過(guò)程操作技術(shù)叫做

 

．
（4）要在分子水平上檢測(cè)成功導(dǎo)入的B基因在大鼠中是否成功表達(dá)，可采用

 

方法，如果高血壓相關(guān)基因已在大鼠體內(nèi)成功表達(dá)，可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：分析題圖：圖示是利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖．圖中①表示體外受精過(guò)程；②是采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因（基因B）導(dǎo)入受精卵的過(guò)程；③表示早期胚胎發(fā)育過(guò)程；④表示從囊胚中去內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；⑤表示核移植過(guò)程．

解答： 解：（1）①表示體外受精過(guò)程，在該過(guò)程之前，需對(duì)人工采集的精子進(jìn)行獲能處理；②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程，當(dāng)受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，常采用顯微注射法；④表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，該過(guò)程需要無(wú)菌、無(wú)毒的條件，因此為了防止污染，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．
（2）從人體細(xì)胞中獲取目的基因（基因B）時(shí)需要用到限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；基因表達(dá)載體的組成部分：?jiǎn)��?dòng)子、目的基因、標(biāo)記基因、終止子，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合部位．
（3）圖示⑤為核移植過(guò)程，該過(guò)程中的受體細(xì)胞甲為減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞．
（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此要在分子水平上檢測(cè)成功導(dǎo)入的B基因在大鼠中是否成功表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交方法，如果高血壓相關(guān)基因已在大鼠體內(nèi)成功表達(dá)，可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型．
故答案為：
（1）獲能     顯微注射法       抗生素
（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）      啟動(dòng)子
（3）減數(shù)第二次分裂中期（MII中期）     核移植
（4）抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖，考查基因工程的原理及技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞核移植的過(guò)程；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件，能準(zhǔn)確判斷圖中各結(jié)構(gòu)或過(guò)程的名稱．