Question

尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細(xì)菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同學(xué)要分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并嘗試進(jìn)行計數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：

K2HPO4 NaCl H2O 葡萄糖 尿素 酚紅 瓊脂

0.12g 0.12g 15mL 0.025g 2.0g 0.25mg 0.5g

（1）分解尿素的細(xì)菌都能合成 脲酶 ，該種細(xì)菌在生態(tài)平衡中起到什么作用？ 參與了氮循環(huán)（或維持氮平衡） ．寫出細(xì)菌分解尿素的方程式 ．

（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？ 不能 （能/不能），原因是 瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物 ．

（3）分離得到分解尿素的細(xì)菌后，如果要擴大培養(yǎng)，則應(yīng)選擇 培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)．培養(yǎng)一段時間后，使用 對微生物細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)．計數(shù)過程中，下列哪種行為會影響計數(shù)的準(zhǔn)確性 A

A．計數(shù)時直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)

B．如果方格內(nèi)微生物細(xì)胞數(shù)量多于300 個，培養(yǎng)液先稀釋后再計數(shù)

C．如果微生物細(xì)胞有粘連，要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個細(xì)胞

D．壓在方格線上的細(xì)胞只計左線和上線上的細(xì)胞數(shù)

（4）為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技術(shù)．

 

Answer 1

（1）脲酶 參與了氮循環(huán)（或維持氮平衡）

（2）不能 瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物

（3）液體 血球計數(shù)板 A

（4）固定化酶

【解析】

試題分析：分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，因此可以選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來分離細(xì)菌，并且本實驗用瓊脂糖來代替瓊脂作為微生物培養(yǎng)基的固化劑，這樣就盡可能使培養(yǎng)基中只含有尿素這一種含氮化合物，有利于對這種細(xì)菌的篩選．

【解析】
（1）含有脲酶的細(xì)菌通過降解尿素為氨作為其生長的氮源，從而也起到維持生物圈氮元素的平衡作用．

（2）從培養(yǎng)基的成分看因為含有瓊脂，所以不能分離出分解尿素的細(xì)菌，因為瓊脂是一種未被純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物，不利于以尿素為氮源的細(xì)菌的篩選．

（3）擴大培養(yǎng)需要使用液體培養(yǎng)基，對微生物或者酵母菌等進(jìn)行計數(shù)時常用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)，再通過計數(shù)得到比較準(zhǔn)確的數(shù)量．計數(shù)過程需要注意操作規(guī)范，如A選項所述的操作會影響計數(shù)的準(zhǔn)確性，應(yīng)該把試管上下倒轉(zhuǎn)數(shù)次，使細(xì)菌分布均勻．

（4）固定化酶技術(shù)可以提高酶的利用率．