Question

甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)可能有一定致畸、致癌作用，利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強(qiáng)弱．請(qǐng)依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告．
Ⅰ．實(shí)驗(yàn)步驟：
（1）制備細(xì)胞懸液：用

 

 處理小白鼠胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液．
（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)：
①取A．B．C三個(gè)潔凈的錐形瓶，分別加入

 

．
②向A．B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的化學(xué)物質(zhì)甲、乙，并將培養(yǎng)瓶搖勻；C瓶不作處理，作為對(duì)照．
③

 

．（要求寫出培養(yǎng)場(chǎng)所）．
（2）制作臨時(shí)裝片
（3）鏡檢和統(tǒng)計(jì)：把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，尋找處于

 

期的細(xì)胞，與小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂高倍顯微鏡照片進(jìn)行對(duì)比，以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞．統(tǒng)計(jì)

 

．
Ⅱ．實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

培養(yǎng)瓶	A	B	C
變異細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)	1.3%	12.5%	0.1%

Ⅲ．請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程

專題：

分析：根據(jù)題干信息“甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)”、“鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱”和“根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性”，可知自變量為甲乙兩種化學(xué)物質(zhì)，因變量是Q值，即變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)．
對(duì)照實(shí)驗(yàn)的三個(gè)步驟：取材、編號(hào)；分別作不同的處理；觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果和得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論．

解答： 解：Ⅰ．（1）制備細(xì)胞懸液：用胰蛋白酶處理小白鼠胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液．
（2）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵循對(duì)照原則和單一變量原則，所以本實(shí)驗(yàn)要設(shè)計(jì)三組實(shí)驗(yàn)，單一變量是有毒物質(zhì)的有無(wú)和有毒物質(zhì)的種類．
①取A、B、C三個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，消毒滅菌，分別加入等量的細(xì)胞懸浮液；
②向A培養(yǎng)瓶中加入化學(xué)物質(zhì)甲，向B培養(yǎng)瓶中加入化學(xué)物質(zhì)乙，并將培養(yǎng)瓶搖勻；C瓶不作處理，作為對(duì)照．
③把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37℃或適宜溫度）的恒溫箱中培養(yǎng)；
（2）制作臨時(shí)裝片
（3）有絲分裂中期的細(xì)胞中染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰，整齊地排列在赤道板上．因此用顯微鏡觀察時(shí)要尋找處于有絲分裂中期的細(xì)胞，并與C組對(duì)比以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞，同時(shí)統(tǒng)計(jì)該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）．
Ⅲ．A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：Q_A=1.3%，Q_B=12.5%，Q_C=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是①甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性；②且乙的毒性比甲的毒性大．
故答案為：
Ⅰ．（1）胰蛋白酶       
①等量的細(xì)胞懸浮液 
③把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37℃（或適宜的相同溫度、適宜的相同條件 ）的CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
（3）有絲分裂中  該期變異的細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)
Ⅲ．結(jié)論：甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大

點(diǎn)評(píng)：本題考查探究實(shí)驗(yàn)，意在考查提升學(xué)生理解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和分析實(shí)驗(yàn)的能力．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要注意單一變量原則和對(duì)照原則．要注意無(wú)關(guān)變量應(yīng)該相同且適宜．