Question

10．隨著社會的發(fā)展，石油產(chǎn)品的使用越來越多，石油烴污染也越來越嚴重．為了篩選出分解石油烴能力更強的微生物，人們不斷地進行研究．請回答與此篩選過程有關(guān)的問題：
（1）一般來說，微生物生長過程中需要的營養(yǎng)物質(zhì)包括碳 源、氮源、水、無機鹽等．
（2）分解石油烴的微生物一般要從土壤中分離，獲取土壤樣品的取樣地點最好選在石油污染明顯處．
如圖為獲取土壤樣品后的培養(yǎng)研究過程

（3）為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過①一④所用培養(yǎng)基，其成分的特點是只含石油烴一種碳源，從而有利于目的菌的生長，抑制其他微生物的生長，這樣的培養(yǎng)基可稱做選擇培養(yǎng)基．
（4）④中的培養(yǎng)基從物理特征看屬于固體培養(yǎng)基，這可以通過往培養(yǎng)基中加入一定量的瓊脂來實現(xiàn)，對④進行接種常采用的兩種方法分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（5）若發(fā)現(xiàn)在⑤中無法區(qū)分菌落，可以將③中取出的菌液進行梯度稀釋．
（6）在實驗室應采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌處理．在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
2、常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．
（2）要獲取相應的菌種，應到相應的環(huán)境中獲取，獲取土壤樣品的取樣地點最好選在石油污染明顯處．
（3）有些培養(yǎng)基可以抑制其他微生物的生長，這樣的培養(yǎng)基可稱做選擇培養(yǎng)基．因此，為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過程①一④所用培養(yǎng)基，其成分的特點是只含石油烴一種碳源，從而有利于目的菌的生長，抑制其他微生物的生長．
（4）④中的培養(yǎng)基從物理特征看屬于固體培養(yǎng)基，可加入凝固劑瓊脂處理，常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（5）若發(fā)現(xiàn)無法區(qū)分菌落，說明稀釋度不夠，可以將重新進行梯度稀釋．
（6）配置好的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行．
故答案為：
（1）碳    氮
（2）石油污染明顯處
（3）只含石油烴一種碳源   目的菌    選擇
（4）固體 瓊脂 平板劃線法 稀釋涂布平板法
（5）進行梯度稀釋
（6）高壓蒸汽滅菌 無菌

點評 本題的知識點是微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，意在考查考生的識圖能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力．