Question

16．測定水樣是否符合飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，常用濾膜法測定大腸桿菌的總數(shù)．大腸桿菌在含有伊紅美藍(lán)的固體培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上長出的菌落呈黑色．如圖所示，濾膜法的大致流程：用濾膜過濾待測水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到EMB培養(yǎng)基上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目．據(jù)圖回答問題．

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要經(jīng)過滅菌處理的是濾杯、濾膜和濾瓶．與過濾有關(guān)的操作都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行．
（2）待測水樣過濾完之后，還有部分細(xì)菌吸附在濾杯杯壁上，將這部分細(xì)菌也盡可能集中到濾膜上的操作為無菌條件下，用無菌水沖洗濾杯，再次過濾．
（3）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，這屬于微生物培養(yǎng)中的接種操作．從功能上看，EMB培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基．
（4）無菌操作下將90ml無菌水加入到10ml待測水樣中，這樣就將待測水樣稀釋了10倍，將稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)為45，黑色菌落為5，則1升待測水樣中的大腸桿菌數(shù)目為500個．
（5）若要測定待測水樣中酵母菌的數(shù)目，應(yīng)更換上述過濾裝置中的濾膜，選擇孔徑更大（填“更大”或“更小”）的濾膜．

Answer 1

分析 濾膜法是檢測水樣中大腸細(xì)菌群的方法．將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計數(shù)和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)．操作簡單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣．

解答 解：（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，這些實驗儀器都需要經(jīng)過滅菌處理，與過濾有關(guān)的操作都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌的污染．
（2）待測水樣過濾完之后，還有部分細(xì)菌吸附在濾杯杯壁上，此時可以在無菌條件下，用無菌水沖洗濾杯，再次過濾，將這部分細(xì)菌也盡可能集中到濾膜上．
（3）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，屬于微生物培養(yǎng)中的接種操作．從功能上看，該培養(yǎng)基中含有伊紅美藍(lán)，因此EMB培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基．
（4）無菌操作下將90ml無菌水加入到10ml待測水樣中，這樣就將待測水樣稀釋了10倍；根據(jù)大腸桿菌鑒定的原理可知，黑色菌落為大腸桿菌，因此1升待測水樣中的大腸桿菌數(shù)目=5×（1000÷10）=500個．
（5）若要測定待測水樣中酵母菌的數(shù)目，酵母菌屬于真核生物，大腸桿菌屬于原核生物，真核細(xì)胞的直徑比原核細(xì)胞大，因此應(yīng)更換上述過濾裝置中的濾膜，選擇孔徑更大的濾膜．
故答案為：
（1）濾杯、濾膜和濾瓶
（2）無菌條件下用無菌水沖洗濾杯，再次過濾
（3）接種        鑒別
（4）10   500
（5）更大

點評 本題以實驗流程圖為載體，考查了微生物的分離與計數(shù)的有關(guān)知識，要求考生掌握濾膜法的原理和步驟，掌握無菌技術(shù)的主要內(nèi)容，識記大腸桿菌鑒定的方法等，結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題．