Question

16．科研人員培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF細(xì)胞），同時將MEF細(xì)胞制成飼養(yǎng)層，用于培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）．
（1）培養(yǎng)小鼠MEF細(xì)胞時，常用胰蛋白（或膠原蛋白）酶來消化剪碎的組織塊，以制備細(xì)胞懸液．配制培養(yǎng)液時，通常需要在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加血清、血漿等一些天然成分．當(dāng)MEF細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面相互接觸時就停止分裂，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
（2）ES細(xì)胞是由早期胚胎（或原始性腺、桑椹胚、內(nèi)細(xì)胞團）中分離出來的一類細(xì)胞，ES細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）MEF細(xì)胞能夠分泌某些蛋白質(zhì)，其合成到分泌至細(xì)胞外的過程是：
核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→囊泡→高爾基體→囊泡，再通過胞吐方式分泌到細(xì)胞外．
（4）在治療性克隆過程中，細(xì)胞核取自患者細(xì)胞，這是為了避免向患者移入組織細(xì)胞后體內(nèi)發(fā)生（免疫）排斥反應(yīng)．

Answer 1

分析 胚胎干細(xì)胞
（1）哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來．
（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞．另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造．
（3）胚胎干細(xì)胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳動物個體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；
②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料，在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機理提供了有效的手段；
③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、少年糖尿病等；
④利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能；
⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，定向培育出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題．

解答 解：（1）制備細(xì)胞懸液時，常用胰蛋白酶來消化剪碎的組織塊．由于人們對細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，故在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等天然成分．在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面相互接觸時，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
（2）哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來．具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞．另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造．
（3）分泌蛋白合成與分泌過程為：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成蛋白質(zhì)→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡→高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)→高爾基體“出芽”形成囊泡→細(xì)胞膜，整個過程需要線粒體提供能量．分泌蛋白質(zhì)以胞吐形式分泌到細(xì)胞外．
（4）在治療性克隆過程中，細(xì)胞核取自患者細(xì)胞，這是為了避免向患者移入組織細(xì)胞后體內(nèi)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．
故答案為：
（1）胰蛋白（或膠原蛋白）    血清、血漿（寫1個即給分）    接觸抑制
（2）早期胚胎（或原始性腺、桑椹胚、內(nèi)細(xì)胞團）    全能性
（3）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)    高爾基體   胞吐
（4）（免疫）排斥

點評 本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．