Question

【題目】苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)如圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問題：

（1）酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有________。

（2）將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸________，以達(dá)到富集酚降解菌的目的；若如圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)一步________，以便于菌落計(jì)數(shù)與分離；制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加________。

（3）如圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中________（填圖中序號(hào)）區(qū)域更易獲得單菌落。

（4）若選擇培養(yǎng)的是纖維素分解菌，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行________的實(shí)驗(yàn)，測(cè)定其分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的________進(jìn)行定量測(cè)定。

Answer 1

【答案】蛋白胨、苯酚 增加 梯度稀釋（稀釋涂布） 凝固劑（瓊脂） ③ （發(fā)酵）產(chǎn)纖維素酶 葡萄糖

【解析】

平板劃線法時(shí)將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。為確定得到的微生物是纖維素分解菌，還需進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種，纖維素酶的測(cè)定方法，一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖繼素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。

（1）酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有蛋白胨、苯酚。

（2）分析實(shí)驗(yàn)可知，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選酚降解菌，因此將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸增加，以達(dá)到富集酚降解菌的目的；若圖1平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)一步稀釋涂布，以便于菌落計(jì)數(shù)與分離；平板培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基需要加入瓊脂作為凝固劑。

（3）圖2為平板劃線法，隨著劃線次數(shù)的增加，菌種進(jìn)一步被稀釋，因此圖中③區(qū)域更易獲得單菌落。

（4）若選擇培養(yǎng)的是纖維素分解菌，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，對(duì)其分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。